辣根过氧化物酶标记的兔抗亲和素

HRP (辣根过氧化物酶) 标记抗体流程

1.         8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶，加入1 ml双蒸水溶解，液体呈棕色。 2.         放入一个磁力搅拌子，电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml，室温下继续搅拌40 min，液体呈现草绿色。 3.         将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中，4 oC 对1  mM pH 4.4的NaAc透析过夜，中间换液3－4次，每次300 ml，溶液最终呈浅棕色。 4.        

辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序

辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序       1．组织切片脱蜡处理等同前；       2．流水冲洗5分钟，3％H2 O2 孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶，避免假阳性)；       3．PBS漂洗3次，每次5分钟；       4．1％牛血清白蛋白孵育，室温20分钟，移去多余液体；       5．加入PBS稀释的辣根过氧化物酶―凝集素，置湿盒内孵育。室温1．5小时；       6．PBS漂洗3次．每次5分钟；       7．呈色  DAB

组化染色背景高？没信号？一篇文章带你快速掌握免疫组化！

与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号，但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法，利用聚合物与二抗结合，形成聚合物-二抗复合物，实现信号放大，该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中，针对 HRP（辣根过氧化物酶）显色系统，其常用底物为DAB/AEC（HRP/DAB 呈棕褐色染色，具有很好的光稳定性，HRP/AEC 呈红色染色，在阳光下会褪色，不易保存。 基础 IHC