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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
抚生实业
- 库存:
48
- 样本:
monkey Proprotein Convertase Subtilisin;Kexin Type 9 ELISA Kit,Proprotein Convertase Subtilisin;Kexin Type 9,PCSK9
- 标记物:
免疫学检验,血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本。
- 适应物种:
人,大鼠,小鼠,鸡鸭鹅,鱼等
- 应用:
ELISA,酶联免疫吸附测定,双抗夹心法
- 检测方法:
竞争法、夹心法、间接法
- 检测范围:
25ng/mL~800ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
| 规格 | 产品名称 | 型号 |
| 48T | 猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9ELISA试剂盒 | AE130707-48T |
| 96T | 猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9ELISA试剂盒 | AE130707-96T |
实验目的:
本试剂盒用于测定植物组织匀浆及相关液体样本中猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9水平。用纯化的猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9,再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猴前蛋白转化酶枯草溶菌素9含量。
试剂盒组成:
特点和优势:
一步法ELISA
一、灵敏度高:(5 x 102细胞/ml)
二、快速:(3 - 4小时)
三、包含阳性对照
四、无需预先标记细胞
五、非放射性分析系统
六、没有物种限制
七、易操作
八、背景低
九、抑制人抗小鼠因子
十、功能测试
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1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
技术提示:
1、混合蛋白溶液时,避免起泡。
2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。
3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。
4、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。
5、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。
6、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
7、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
8、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。
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文献和实验动脉粥样硬化模型小鼠在是实验上存在一定的限制,如没有相关课题时需要一直保种饲养,随后,大量繁殖集齐数量足够年龄相近的小鼠也需要时间,近年来,科学家们建立了一种快速、简便、通用和经济有效的、利用病毒注射野生型小鼠的造模方式:AAV9-Pcsk9D377Y尾静脉注射。 Pcsk9D377Y过表达是近几年新出现的动脉粥样硬化急性模型之一。前蛋白转化酶枯草溶菌素转化酶9 (proprotein convertase subtilisin/kexin type 9, Pcsk9)主要由肝脏表达,介导
混匀即可。 (5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。 二、试剂准备 在临床实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤
产生假阳性反应。一般说来,在 3 天内测定的血清标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。 2. 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。 ELISA 中用的蒸馏水或去离子
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