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密理博
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UFC910024
一般描述
垂直设计和有效的膜表面积提供了快速的样品处理,高样品回收率(通常大于90%的稀起始溶液),以及80倍浓度的处理能力。垂直设计最大限度地减少了溶质极化和随后的膜污染,过滤装置中的物理永停点可防止纺丝干燥和潜在的样品损失。
使用移液管从过滤装置的样品库中收集浓缩液,同时将超滤液收集在所提供的离心管中。该装置可在摆动斗中旋转,也可在定角转子中旋转。Amicon® Ultra 15 mL过滤器采用垂直膜设计和永停点,可在短旋转时间内提供最高回收率。
应用
- 采用100,000 Dalton分子量截止超滤®膜进行超滤。
- 含抗原、抗体、酶、核酸或微生物的生物样品的浓度。
- 纯化在组织培养提取物或细胞裂解液中发现的大分子成分,并在高效液相色谱法之前去除蛋白质。
- 从柱洗脱液稀释或预先纯化的蛋白质的浓度。
- 脱盐,缓冲液更换和蛋白质透析。

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文献和实验的位置就停止电泳了,这时候marker已经分开一些了。7、接上一条,marker分开了一些,但是实话说分的并不好,你如果想同时测好几个蛋白指标是很困难的,不好切胶,也不好敷条带,所以我的建议,小分子蛋白就单独出来跑吧。8、电泳完成后,开始电转,电转过程我试过90V恒压60分钟,也试过250ma恒流15分钟,对于我的蛋白都能得到满意结果。9、转膜后条带是否必须戊二醛固定?经过我的尝试,对于我的11KD蛋白来说固定不固定没有影响,那么即使固定了,戊二醛也不会影响后续的抗原抗体反应。所以各位同学们固定
1/3~1/5的膜;透过目标物,孔径应选5-10倍的膜。 【求助】准备用millipore 的超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白,在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子,但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是Amicon Ultra 15ml规格的管子,不知道有没有谁以前做过的,有关于转速,时间给一些建议,另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理?离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失?如果要把管子重复利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是将其浸到乙醇中防于4度,还是在管子中灌入
吧,以我的经验来看,除非目的蛋白特别小,或者特别大,不然转膜时间真的不是那么重要,曾经因为失误,转了15 min就拆下来了,但从丽春红染色来看,跟平常实验也没有太大的区别。 蛋白来源:内皮细胞 总蛋白 蛋白名称(可保密):occludin & AKT 蛋白分子量:65 KD & 56 KD WB用膜类型、孔径:0.45 PVDF 转膜方式(恒压、恒流):湿转 恒压 100 V 转膜时间:60
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