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Protein
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盛祺兆生物
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100 µg
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文献和实验为His-tag 与 Strep-tag® 系统的耐受缓冲液对比 如果分离纯化膜蛋白或包涵体时,则纯化过程需要涉及到变性条件。 Strep-tag®系统最多允许的尿素浓度为6M,盐酸胍为1M,而His-tag 则为8M和6M。如若需要增加蛋白的溶解度,使用去垢剂,则两种系统均可兼容Triton-X100,Tween 20和Nonidet P40。 但不是所有的蛋白过表达后都在包涵体内,且膜蛋白仅占细胞表达蛋白的20%-30%。 因此,如果纯化过程需要考虑特殊的纯化条件,两种系统是都可以选择的。但如果比较
analysis of gene expression (DSAGE) measures global gene transcript levels from only 1 to 2 µg total RNA by massively parallel sequencing of cDNA tags. This unit describes the construction of 21?bp cDNA tag libraries appropriate for massively parallel
Small scale His-Tag fusion protein purification under denaturative conditions
1ml with wash buffer + 10mM imidazole (keep 40µl for PAGE-SDS) 11 Elute with 2x100µl elution buffer + 100mM imidazole (keep 40µl for PAGE-SDS) 12 Final elution : 2x100µl 250mM imidazole (keep 40µl for PAGE-SDS) 13 Run on PAGE-SDS
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