牛纤维连接素相关抗原(FRA) ELISA 试剂盒

牛纤维连接素相关抗原(FRA) ELISA 试剂盒

 

实验原理

 

 

  

试剂盒内容物包括：

Vial 1：含有钙，镁，碳酸氢盐和酚红的EBSS溶液，此试剂的等分液用于重溶其他小瓶和制备稀释的抑制剂溶液。

Vial 2：含有L-cysteine和EDTA的木瓜蛋白酶，每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升 1mM的 L-cysteine和0.5mM EDTA中20units的木瓜蛋白酶溶液。

Vial 3：脱氧核糖核酸酶I (DNase I)，5×2000单位，每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用0.5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升产生2000units的DNase I溶液。

Vial 4：类卵母细胞蛋白酶抑制剂Ovomucoid protease inhibitor，每包1瓶，重溶后体积为32ml。

该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用32ml的 EBSS溶液重溶(Vial 1)生成的溶液的有效浓度为每毫升10mg类卵母细胞抑制剂和10mg白蛋白。

 

 

 

神经组织分离试剂盒（Papain Dissociation System）

Papain Dissociation System是基于美国科学家Huettner和Baughman对神经细胞分离方法而研发出来的一套试剂（J. Neurosci., 6, 3044, 1986）。每个批次都在大鼠脊髓神经细胞分离中进行过性能测试，该试剂盒为每个实验提供新鲜制备的酶溶液。

该包装包含足够的材料分离5个独立的组织等分体，每个高达0.3-0.4立方厘米。对于较大的组织样本，在每个步骤中按比例准备较大体积的试剂，并按协议中所述的相同比例将其组合。

 

 

 

试剂盒组成

 

 

牛纤维连接素相关抗原(FRA) ELISA 试剂盒

 

操作步骤 

 

 

DNaseI通常有以下几个用途：
1. 去除细胞培养过程中DNA的含量，可以降低黏度，因此获得更多的细胞；
2. 用于生物过程中的DNA移除；
3. 在进行RT-PCR前，除去RNA制剂中的基因组DNA；
4. 体外转录
5. Nick翻译
6. DNase I足迹分析
7. 肌动蛋白结合
8. 蛋白质与核算的UV交联
9. 放射性标记

 

结果分析

1. 每个标准品的OD值减去空白孔的OD值后作图，如设置复孔，则应取其平均值计算。以标准品的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘出标准曲线。亦可以OD值为横坐标，标准品的浓度为纵坐标，绘出标准曲线。

2. 推荐使用专业的曲线制作软件，如curve expert 1.3或1.4，在软件界面既可根据样品OD值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；亦可将样品的OD值代入标准曲线的拟合方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

3. 若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。 

 

 

 

注意事项

 

1. 试剂盒保存在 2-8℃，使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍，终结果乘以5才是样本终浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

6. 若中英文说明书有误，请以中文说明书为准。

7. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

8. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 

 

 

兔轴蛋白抑制蛋白2(AXIN2) ELISA 试剂盒  注意事项  96T/48T