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- 2025年09月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
33
- 英文名：
H9
- 规格：
100ml
储存条件
基础培养基2 ~ 8℃，添加剂-20℃；2 ~ 8℃解冻，禁止反复冻融。
产品简介
H9细胞铺底工作液是使用基质胶配制好的即用型工作液，可以为人多潜能干细胞（ES/H9）无饲养层培养（feeder-free culure）提供理想的底物支持。与H9细胞完全培养基联合使用，可以稳定维持人ES/H9在体外培养的多潜能性、快速增殖能力和正常的核型。
产品内容
| 组分 |
名称 |
规格 |
数量 |
| H9Med |
H1细胞铺底工作液-基础液 |
90mL |
1瓶 |
| H9Med |
H1细胞铺底工作液-添加剂 |
10mL |
1瓶 |
iPS细胞铺底工作液-添加剂分装
1. 提前一天在4℃冰箱中解冻H9细胞铺底工作液-添加剂，
2. 提前准备无菌干燥的移液管或枪头，EP管置于-20℃冰箱预冷，
3. 将化冻的H9细胞铺底工作液-添加剂，置于冰上放入生物安全柜，
4. 用预冷的移液管或枪头将H9细胞铺底工作液-添加剂按1mL/支分装到EP管中，并放入-20℃保存。
工作液配制
取分装好的1mL H9细胞铺底工作液-添加剂放入4℃冰箱解冻，
1. 30min后，将解冻的H9细胞铺底工作液-添加剂加入到9mL基础液中，并充分混匀，
2. H9细胞铺底工作液推荐使用量：
| 培养器材 |
推荐用量（mL） |
| 6孔板 |
1 |
| T25培养瓶 |
3 |
| T75培养瓶 |
8 |
| 10cm培养皿 |
6 |
3. H9细胞铺底工作液完全覆盖瓶/皿底，置于37℃培养箱2h或过夜。
注意事项：仅限科研用。
培养体系中的一些组分是对人体健康有害的物质，请不要用暴露的皮肤接触培养体系的液体和有培养体系的液体残留的容器内部；这部分有害物质的浓度和危害性都较低，如有接触，立即用自来水冲洗即可。
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文献和实验培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
基（DMEM、1640、F12 等） ✘ 此种培养条件细胞处于饥饿状态，会将培养基中的营养物质（包括外泌体）全部消耗掉的，上清液中的外泌体含量低。 4 外泌体专用无血清培养基 ✔ 不含异源外泌体 常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长，而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了，需要通过预实验摸索。 第二步细胞上清液预处理：获得高质量外泌体预处理也很重要。细胞上清液中有什么物质？除了我们感兴趣的外泌体外，还有少量细胞、细胞碎片、游离蛋白、脂类等。需要做的就是通过差速
一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的，去外泌体血清难以做到 100% 的去除的，因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体，而外泌体专用无血清培养基，也不是适合所有的细胞，常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长，而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了，所以也需要一些预实验的摸索。 还有，那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢？这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下，是处于饥饿状态的，细胞会将培养
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