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RNF114; E3 ubiquitin-protein ligase RNF114; RING finger protein 114; RING-type E3 ubiquitin transferase RNF114; Zinc finger protein 228; Zinc finger protein 313
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MedChemExpress LLC
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询盘
产品来源: www.medchemexpress.cn/recombinant-proteins/.html
Synonyms: RNF114; E3 ubiquitin-protein ligase RNF114; RING finger protein 114; RING-type E3 ubiquitin transferase RNF114; Zinc finger protein 228; Zinc finger protein 313
Species: Human
Source: E. coli
产品分类:泛素相关蛋白 | 泛素酶 | 泛素连接酶 | 酶和调节子 | 转移酶
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文献和实验一、GST pull-down 基本知识1. GST pull-down 概念GST pull-down:是利用重组技术将探针蛋白与 GST 谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过 GST 与固相化在球珠上的 GSH 谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。2. GST pull-down 研究对象二、GST pull-down 原理1. GST pull-down 结合原理2. GST pull-down 分离原理三、GST pull-down 流程1. 蛋白的抽提与纯化:①
今天进行了GST融合蛋白的表达,pGEX-4T-1载体,BL21菌。 步骤:摇菌至A600:0.7,然后加IPTG诱导3小时,温度35度(终浓度:0.3mM),取1ml诱导后菌,离心去培养基,冰冷PBS洗一次,离心,吸净液体,加入1*上样缓冲液50微升和终浓度1mM PMSF,100度煮菌5分钟,离心,取20微升上清跑胶。结果如图。 1.空载体对照有GST的表达 2.所有重组载体同样有GST大小的片断,(箭头 B) 3.箭头A所示的条带在空载体和重组载体处有明显差异。 4.我的目的蛋白
以下为有关于gst的帖子,供大家参阅: 大肠杆菌表达的GST和人的GST有同源性么 http://www.dxy.cn/bbs/thread/402809 如何去除GST融合蛋白以外的GST的表达? http://www.dxy.cn/bbs/thread/711228 请教GST蛋白的纯化 http://www.dxy.cn/bbs/thread/585739 GST pull down http://www.dxy.cn/bbs/thread/496138
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