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- 文献和实验
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199
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亦高生物
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现货
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3年
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1个/包,12包/箱
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文献和实验至200ml。后送至高压灭菌。室温保存。 再配制50×TAE溶液:在400ml蒸馏水中溶解121g Tris碱,加入28.55ml冰乙酸和50ml 0.5ml/L EDTA溶液,再加蒸馏水定容至500ml,室温保存。 (2)琼脂糖溶液(1.0%): 50×TAE溶液取10ml,稀释成500ml,取50ml溶解0.5g琼脂糖,电炉上煮至沸腾,溶化的琼脂物冷却至60℃左右时加入10mg/ml EB 5ul,充分混匀,将温热的凝胶倒入已置好梳子的电泳板中,在室温下放置45min左右后进行电泳
。当chamber 上方盖上盖玻片后,每个大正方形之体积为1 mm2 x 0.1 mm=1.0 x 10-4 ml。使用时,计数每个大正方形内之细胞数目,乘以稀释倍数,再乘以104,即为每ml 中之细胞数目。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分离的过程对细胞是否有损伤作用。复苏后的细胞也要检查活力,了解冻存和复苏的效果。 存活测试之步骤为dye exclusion,利用染料会渗入死细胞中而呈色,而活细胞因细胞膜完整
的心室肌约2mm见方,滴加1ml进口胎牛血清,均匀接种于处理过的50ml培养瓶中,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞孵育箱静置培养,使其贴壁,4小时后追加20%胎牛血清的DMEM高糖培养液4.5ml/瓶,约48小时后组织块周围有星形细胞长出,80至96小时组织块周围有大量细胞长出,去除组织块,继续培养36-48小时,待细胞汇合铺满瓶底后用含0.125%胰蛋白酶、0.02%EDTA的消化液消化细胞进行传代,取用第二代细胞进行进一步鉴定和实验。 (五)观察。接种6-12h,开始贴壁,并有集合现象
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