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文献和实验应对照组为Acholeplasma laidlawii (ATCC 23206) 与M. arginini (ATCC 23838)。负反应对照组为待测细胞之新鲜培养基。结果判读: · 支原体生长较慢,所以先在液体培养基培养1~2周增殖后,再培养于agar plate上。需至少培养3星期后,才可断定是否有支原体污染。所以整个测试需5个星期才知正确结果。 · 典型之支原体菌落类似荷包蛋(fried- egg like),乃是由于支原体往agar下层生长所致,为圆形无色透明菌落,大小约10-55μm。但是并非所有的支原体皆
。培养一周及二周后,分别取0.1 ml液体培养液涂在agar plate上,将其倒放置于37℃厌氧箱培养,培养至少3星期,持续观察是否有支原体之菌落出现。 · 另取1 ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液,涂抹在agar plate上,37℃厌氧培养3星期,持续观察是否支原体菌落出现。 · 另作正负反应对照组,正反应对照组为Acholeplasma laidlawii (ATCC 23206) 与M. arginini (ATCC 23838)。负反应对照组为待测细胞之新鲜培养
测试样品:样品种类:1ml待测之培养基,1ml待测细胞培养 液(可将细胞稍微刮下:,0.05~0.1ml冷冻管之细胞悬浮液。4.将测试样品加入chamber slide内,培养5天后,进行Hoechst 33258的荧光染色观察。5.以Acholeplasma laidlawii ATCC 23206 感染Vero细胞作为正反应对照组:或是已感染支原体之细胞培养 液或冷冻细胞液:,负反应对照组为Vero cell之新鲜培养基( αMEM +10%FBS)。6.DNA荧光染色检测: ①取出培养5日
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