Broadpharm代理商-Ansamitocin P 3

Single Primer ("Semi-Random") P

to about 1 ng/µL 3 µL "T/TS" @ 0.4 u Taq/µL -------- 30 µL Cycle as follows: 30"x94°C 20 cycles 0"x94°C 0"x55°C 1'x72° S=9 30 cycles 0"x94°C 0"x40°C 1'x72° S=6 30 cycles 0"x94°C 0"x55°C 1'x72° S=9 Clean up: Add 1 µL ExoI

【求助】目标产物表达量低，普通PCR P不出来

2+ 1.5ul primer(F+R) 0.2ul Taq 0.2ul ddH2O 11.1ul 94℃ 3min 94℃ 45s 56℃ 45s 38cycles 72℃ 1min 72℃ 10min,4℃ hold forever PS：做逆转录时mRNA为2ug PCR结果是用1.5%凝胶电泳检测，除了内参GAPDH，没有

检测鼠肝肌动蛋白(p―acdn)基因

过程，在附加的一对引物(人工合成的寡核苷酸片断，它与待扩增片断两条链的两端珍NA序列分别互补)之间引发聚合酶反应。 PCR全过程基于一套“三步曲”：(1)DNA模板的变性，在95℃高温附近，模板DNA双链变性形成单链DNA而游离于反应溶液中；(2)与附加引物退火，在降温过程中，加入反应体系中的两种引物将退火至相应互补的DNA链上；(3)引物延伸(扩增步骤)，将反应体系调节到所选用的DNA聚合酶的最适温度(72℃左右)，在4种dNTP存在下，DNA聚合酶延着引物和模板复合物，由5’→3’端延伸