Sigma：乙二醇-双（琥珀酸N-羟基琥珀酰亚胺酯），E32

做好抗体标记，这4种方法你都用对了吗？

值比率（ 495/280 或 550/280 ），选取适当组分合并。   生物素标记抗体 抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高！这种方法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基与酰化的生物素共价结合，生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料-链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。 操作步骤 1.用无水 DMSO 配制 10mg/ml 生物素 N- 羟基琥珀酰亚胺酯溶液。 2.硼酸盐缓冲液（0.1mol/L, pH8.8 

单克隆抗体的标记

/ml的N-羟琥珀酰亚胺生物素（应根据需要选用不同大小和间臂长的生物素化琥珀酰酯）。 2、用硼酸钠缓冲液（0.1mol/L，PH8.0）稀释单抗溶液至1-3mg/ml。 3、每毫克抗体加入25-250ug的生物素酯，混匀后，室温作用4小时。 4、按每250ug生物素酯加入20ul 1mol/L NH4Cl终止反应，室温放置10分钟。 5、以PBS充分透析除去游离生物素，标记抗体冻存。 五、其他标记技术 适用于蛋白质的其他标记方法也可用于单抗，如金标记、化学发光标记、SPA标记、铁蛋白标记等。

单克隆抗体的标记种类及操作步骤

可产生105-106cpm的抗体)。 (3)经C02培养箱中培养过夜，离心后，吸出培养上清，分别加入1/20体积的1mol/L Tris(PH8.0)及叠氮钠至浓度0.02%。该标记抗体可按纯化单抗方法进行。 四、生物素标记 生物素标记反应常用生物素琥珀酰亚胺酯进行。生物素是与抗体分子的游离赖氨酸等发生偶联反应而完成标记。其主要步骤是： 1、用二甲基亚砜配制10mg/ml的N-羟琥珀酰亚胺生物素(应根据需要选用不同大小和间臂长的生物素化琥珀