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- 详细信息
- 文献和实验
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现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
个
搭配BS-24-PB免疫组化抗原修复盒使用
主要用于常规染色、免疫组化以及原位Northern或Southern杂交等。可以同时对于
24个载玻片上的样品进行相关实验操作。
本产品可以耐受煮沸,并可以用于微波炉加热,可以用于需要加热的抗原修复操作等。
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文献和实验静置,或 37℃ 1 小时;12)II抗中可加入 0.05% 的 tween-20。13)PBS 洗 3 次各 5 分钟;14)DAB 显色 5~10 分钟,在显微镜下掌握染色程度;15)PBS或自来水冲洗 10 分钟;16)苏木精复染 2 分钟,盐酸酒精分化;17)自来水冲洗 10~15 分钟;18)脱水、透明、封片、镜检。 二、SABC法 1)脱蜡、水化。2)PBS 洗两次各 5 分钟。3)用蒸馏水或PBS配置新鲜的3%H2O2,室温封闭5~10分钟,蒸馏水洗3次。4)抗原修复。5)PBS洗5分钟
不完全,若存在,需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 (5)抗原修复不完全:对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位,以利于与抗体结合。 (6)细胞通透不全,抗体未能充分进入胞内参与反应:可加入组织透化步骤,进行细胞膜或核膜的透化。 (7)试剂盒保存不当:请于 4℃ 进行保存,勿室温防止过长时间。 (8)封闭时间过长:若使用封闭液进行封闭,请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2:免疫组化染色弱怎么办? (1)抗体浓度过低,孵育时间过短:可提高抗体浓度,进行抗体4℃过夜孵育。 (2)组织
染色通常需要样品制备、抗原修复、封闭、目的抗原检测等操作。IHC 实验成功的关键在于稳定、优化且可重复的染色方案。下图为 IHC 的实验操作步骤。 图 4 IHC操作步骤 免疫组化样本固定多使用甲醛进行固定,通过形成亚甲基桥而将蛋白交联起来,掩盖掉抗原位点,从而影响抗原-抗体的结合。抗原修复则会破坏这些亚甲基桥,暴露出抗原位点,使抗体能够与之结合。用于抗原修复的两种方法分别为热诱导表位修复法和酶修复法。 表 3 抗原修复方式分类 图 5 免疫组化实验检测 Phospho-Akt 表达 注
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