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Lipo293F™转染试剂C0
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上海碧云天生物技术股份有限公司
1ml/10ml/100ml
碧云天生产的Lipo293F™转染试剂(Lipo293F™ Transfection Reagent)是一种非常高效的基于阳离子脂质体的新型转染试剂,专门适用于悬浮培养的HEK293细胞,如Freestyle™ 293-F等,进行质粒转染和重组蛋白大量表达。本产品与Thermo公司的293fectin™ Transfection Reagent和Merck公司的293-Free™ Transfection Reagent的用途和使用效果基本一致,与Thermo公司的FreeStyle™ MAX Reagent相比,用于悬浮培养的293细胞时效果基本一致。Lipo293F™转染试剂对Freestyle™ 293-F细胞的转染效率非常高(约85%),同时细胞毒性极低、重复性好、操作简单、转染后无需更换培养液。悬浮培养293系列细胞转染试剂的比较和选择请参考:http://www.beyotime.com/support/lipo293F.htm。Lipo293F™转染试剂也同样适用于293系列贴壁细胞的转染,但转染293系列贴壁细胞时,推荐使用性价比更高的Lipo293™。Lipo293F™转染试剂转染时血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少避免很多阳离子脂质体因为需要在转染时去除血清而对细胞造成的损伤。Lipo293F™转染试剂毒性极低,转染后无需更换培养液,一方面细胞的良好生长状态保证了目的蛋白的大量表达,另一方面又减少了操作步骤并节省了培养液。Lipo293F™转染试剂转染Freestyle™ 293-F细胞目的蛋白表达质粒后,通常在48-72小时后达到比较理想的蛋白表达水平。Lipo293F™转染试剂的转染效率可以通过转染表达EGFP等荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。Lipo293F™转染试剂转染Freestyle™ 293-F细胞效果请参考图1。
图1. Lipo293F™转染试剂用EGFP表达质粒转染Freestyle™ 293-F细胞的效果图。A和B,转染48小时后,10倍物镜下Freestyle™ 293-F细胞悬浮状态(无血清培养基中不加血清)的明场照片(A)和荧光照片(B)。C和D,转染48小时后,20倍物镜下Freestyle™ 293-F细胞悬浮状态(无血清培养基中不加血清)的明场照片(C)和荧光照片(D)。E和F,转染48小时后,20倍物镜下Freestyle™ 293-F细胞贴壁状态(无血清培养基中加10%血清)的明场照片(E)和荧光照片(F)。
每毫升Lipo293F™转染试剂可以转染500毫升悬浮培养的293-F细胞。包装清单:
保存条件:4℃保存。长期不使用可以-20℃保存。-20℃保存后会有沉淀产生,须37℃水浴30min,使完全溶解后才能用于细胞转染。注意事项:使用高纯度的DNA有助于获得较高的转染效率。对于质粒,可以使用碧云天生产的质粒大量抽提试剂盒(D0026)进行抽提,以保证可以获得较高的转染效率。-20℃等低温保存后本产品会结冻,溶解时会出现沉淀,此时37℃水浴30min,使完全溶解就可以用于细胞转染,并且不会影响使用效果。收到的本产品可能会因为干冰等低温运输导致溶解后出现沉淀,37℃水浴30min,使完全溶解就可以正常使用了。如果37℃水浴30min还有少量沉淀,也可以直接混匀后使用,经测试并不会影响使用效果。转染前细胞必须处于良好的生长状态。需自备不含抗生素的无血清Freestyle™ 293-F细胞培养液,可以使用SMM 293-T1培养基(M293TI-1)。Lipo293F™转染试剂不能vortex或离心,可以用移液器轻轻吹打混匀或缓慢摇动混匀。Lipo293F™转染试剂使用后请立即盖好盖子,避免长时间暴露在空气中,影响转染效率。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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