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- 2025年07月12日
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- 保存条件：
store at -20 °C. avoid freeze/thaw cycles, store dark. Storage at 4 °C for up to 3 months possible.
- 保质期：
1年
- 英文名：
qPCR ProbesMaster lowROX
- 库存：
100
- 供应商：
艾美捷科技
- CAS号：
无
qPCR探针Master lowROX，qPCR ProbesMaster lowROX，qPCR探针Master lowROX,qPCR ProbesMaster lowROX
qPCR探针Master lowROX-qPCR ProbesMaster lowROX
产品货号：PCR-361L
产品规格：10x1,25ml(1250reactionsx20ul)
qPCR ProbesMaster lowROX; Master mix for quantitative real-time PCR using labeled DNA probes; 2 x conc. master mix; Molecular Biology;
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文献和实验荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外，qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况： 1. 复孔间重复性差怎么办？ 复孔间重复性差一般会有以下两种情况： （1）CT 值很大，如 CT≥ 30，重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布，即在有效模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性，直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法：如果融解曲线没有杂峰，无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上，那 CT 值为准确的，可多设置
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400mM；模板如果是总RNA一般是10ng-500，如果cDNA，通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液，要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值，在操作过程中，还需要根据所用
是由于体系内引物与引物纠缠比引物与模板结合更容易导致的，可以尝试提高模板浓度、退火温度或者降低引物浓度来进行改善； 另外，当目的基因表达量极低时，染料法容易形成引物二聚体产物影响实验结果，此时，建议使用探针法定量。 （2）杂峰在主峰之后，非引物二聚体 上图这种情况就是非特异性扩增，可能是引物特异性不好引起的，也可能是空气中有气溶胶污染所导致。 大家可以先增加退火温度再试试看，如果没有改善，那么就需要重新更换引物啦。为了避免这种麻烦，小 V 建议大家在进行 qPCR 实验之前，就对自己的引物
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