科研血清 丹麦SSI沙门诊断血清试剂盒

 简要描述：沙门诊断血清采用实时荧光PCR技术，针对沙门氏菌血清型特异性基因设计引物和探针。PCR扩增过程中，与模板结合的探针被Taq酶分解产生荧光信号，荧光定量PCR仪根据检测到的荧光信号绘制出实时扩增曲线。

 沙门氏菌抗血清在兔体内培育，包括O和H抗血清。Vi抗体为单克隆抗体，在小鼠腹腔液中生成并提取。根据试验目的，抗血清可单独或联合使用。抗血清供应规格为3 ml瓶装产品（以叠氮hua钠作为防腐剂）。已通过吸附排除交叉反应。

 当细菌培养物与直接针对细菌表面成分的特异性抗血清混合时，细胞之间将通过抗原-抗体键结合在一起而形成聚集（凝集）。通常裸眼可以观察到在悬液中的团块形成。通过将特异性抗血清与沙门氏菌培养物混合，可以确定O和H抗原。根据观察到的凝集结果并结合Kauffmann-White表1可确定细菌的血清型。

丹麦SSI沙门氏菌属诊断血清试剂盒说明书

步骤通用
将生理盐水作为阴性对照，并且其检测结果必须为阴性。如阴性对照结果为阳性（凝集），则表明菌株发凝集，即O粗糙型。

与O和H抗血清的玻片凝集
使沙门氏菌在非选择性琼脂培养基上生长过夜。半固体琼脂培养基是最适用于H分型的培养物生长的培养基，但如H抗原表达良好，则可以在非选择性琼脂培养基上确定血清型。
1. 将一小滴（约20 μl）抗血清滴在玻片上。
2. 将来自培养基的一些菌落取样转移到抗血清液滴中，然后充分混合。培养物的数量应足以产生明显的乳白色混浊。取样使用接种环或牙签。
3. 将玻片前后倾斜5 – 10秒。
4. 手持玻片在采用暗背景的光源前（间接照明）用裸眼进行观察，读出反应结果。

5. 阳性反应为可见凝集。阴性反应为保持均一的乳白色混浊。迟发或较弱的凝集应视为阴性结果。 无反应的原因可能是菌株表达Vi抗原（见下文）、所用抗血清未能包含待检菌株的血清型或菌株并非沙门 氏菌。

Vi 抗原的检测
Vi抗原的存在可能干扰或阻止菌株与O抗血清的凝集反应。因此对阴性分离株必须检测Vi抗原。因在Vi抗 原中可能形成变异，所以选择单一菌落是非常重要的，表达Vi抗原的菌落较Vi阴性菌落的不透光性更强。
在琼脂平板上的H相诱导（S. Gard方法）2
1. 使半固体琼脂在微波炉或水浴中融化（100 °C），然后冷却至45°C。
2. 将100 μl用于相诱导（对应于已经确定的相）的H抗血清置于一个小培养皿的中央。
3. 将10 ml半固体琼脂倒入抗血清中，最终结果是形成相诱导血清的1:100稀释液。
4. 将平板于室温（22-25°C）下放置10-15分钟，待其凝固。
5. 用接种环从琼脂平板或肉汤培养基中取出一满环新鲜细菌培养物，接种在平板的中央。
6. 于35-37°C培养一整夜。
7. 在生长区域边缘取培养物用于玻片凝集。使用Kauffmann-White表选用相关的H抗血清。 如H相诱导未成功，则需考虑增加在半固体琼脂平板中的抗血清数量。

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