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猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测
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武汉天德
999
血液,组织,细胞
猪
用于检测猪瘟病毒抗体
ELISA
猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒使用说明书【兽用名称】产品货号 TD-CHQ004通 用 名 猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒商 品 名 无英 文 名 Blocking ELISA Kit For Detection of Antibodies to Classical Swine Fever Virus 汉语拼音 Zhuwenbingdu Zuduan ELISA Kangti Jiance Shijihe【主要组分与含量】
【作用与用途】 用于检测猪瘟病毒抗体。【注意事项】(1)实验前,将试剂盒取出置25℃±3回温,至少30分钟,实验完成后置2~8℃保存。(2)若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物,属正常现象。(3)请在试剂盒规定的有效期内使用;禁止非同批试剂盒混用。(4)没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内,置2~8℃存放。(5)避免底物液暴露于强光,避免接触氧化剂。(6)浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。(7)严格按照操作程序,仔细的吸液、计时,充分洗涤,对于获得精确的结果是非常必要的。(8)使用血清稀释板将所有待检血清稀释好,再进行检测。【用法与判定】 1 用法1.1 样品准备 取动物全血,待血液凝固后,4000r/min离心10分钟,收集上清。或采集血液,待凝固后自然析出血清。血清应清亮,无溶血。1.2 样品稀释 在血清稀释板中,用样品稀释液按1:1的比例稀释待检血清(例如:120μl样品稀释液中加120μl待检血清);阴性、阳性对照不稀释,直接使用。1.3 洗涤液配制 20倍浓缩洗涤液使用前应恢复至室温(20~25℃),摇动使沉淀溶解(建议在37℃水浴锅中加热至完全溶解),然后用蒸馏水或纯水作20倍稀释,混匀(例如:10ml的浓缩洗涤液加上190ml纯水)。稀释好的洗涤液在2~8℃可以存放7日。1.4 操作步骤1.4.1 取抗原包被板(根据样本多少,可拆开分次使用),每孔加入稀释好的洗涤液300µl,不必静置,弃掉孔中洗涤液,洗涤2次,最后一次拍干。每孔加入稀释好的样本100μl;另外设阳性对照、阴性对照各2孔,100μl/孔。置37℃孵育60分钟。1.4.2 弃去板中液体,每孔加入稀释好的洗涤液300µl,不必静置,弃掉孔中洗涤液,重复洗涤共计洗板5次,最后一次拍干。1.4.3 每孔加入100μl酶结合物,轻微振荡混匀。置37℃下孵育30分钟。1.4.4 弃去板中液体,洗涤5次,方法同1.4.2。1.4.5 每孔加底物显色液100µl,室温(20~25℃)避光显色10分钟。1.4.6 每孔加终止液50µl。10分钟内用酶标仪测定并记录各孔在630nm波长处的吸光度(OD)值(测定前轻轻振匀,勿溢出)。2 判定2.1 成立条件 在酶标仪上测各孔OD630nm值,试验成立条件是阴性对照的OD630nm平均值≥0.6,阳性对照的OD630nm平均值≤0.52.2 判定标准 S为样品孔OD630nm值,N为阴性对照OD630nm平均值。阻断率=(1-S/N)×100%如果阻断率<40%,判为非洲猪瘟病毒抗体阴性;如果阻断率≥40%,判为非洲猪瘟病毒抗体阳性。【规格】 96孔/盒【贮藏与有效期】 2~8℃保存,有效期为12个月。
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