Protein A和Protein A/G抗体纯化磁珠系列产品是利用蛋白偶联技术使 Protein A和Protein A/G共价包被到 NHS 活化的超顺磁性微球表面。该产品具有抗体结合能力高、蛋白非特异吸附率低以及洗脱条件均一的特点,一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体。微米级磁珠提供的超大比表面积,大幅缩短抗体与抗原吸附所需的平衡时间,15 min 内即可完成抗体吸附过程,30 min 内完成抗体纯化流程。本抗体纯化磁珠试剂盒配有经过优化的预制缓冲液,为抗体纯化实验提供了最佳的反应条件,增强了抗体纯化实验的稳定性。
本产品粒径为2μm,结合 Human IgG 能力(Antibody Capacity)为1.8~2.0 mg/mL,广泛应用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化,也可用于抗体固定及其它相关研究。操作者可根据目标抗体的种属来源及亚型选择磁珠的类别,Protein A,Protein A/G 磁珠与不同抗体的亲和性比较参见附表 1。
产品组分:
编号
产品名称
BL1264A
BL1264B
1
抗体纯化磁珠
1 mL
5 ml
2
抗体结合缓冲液
100 mL
500 ml
3
抗体洗脱缓冲液I(pH4.5)
50 mL
250 ml
4
抗体洗脱缓冲液II(pH2.0)
50 mL
250 ml
5
抗体中和缓冲液
10 mL
50ml
6
磁珠洗涤缓冲液
10 mL
50ml
7
磁珠储存缓冲液
10 mL
50ml
8
磁珠再生缓冲液
10 mL
50ml
使用方法(仅供参考):详见说明书。
注意事项:
1、本产品须与磁性分离器配套使用。
2、磁珠使用前应充分振荡均匀。
3、磁珠应保存在储存溶液中,防止干燥。
4、请勿将磁珠冷冻或离心,以免引起不可逆聚集。
5、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题及解答:
Q1:如何提高抗体与磁珠结合效率?
A1:磁珠与抗体的结合效率与抗体的种属来源及所属亚型有关,请确认抗体的类型与 Protein A 配基的亲和效率(附表 1),如抗体所属亚型与 Protein A 的亲和度较低,可以通过增加抗体与磁珠的孵育时间(30~120 min)、提高结合缓冲液的 pH 值(8~9)及降低离子强度(25~100 mM NaCl)等方法提高亲和效率,或选择与目标抗体具有更高亲和度的配基(如 Protein A/G)。
Q2:如何提高抗体洗脱效率?
A2:抗体与Protein A配基亲和度太高导致抗体洗脱效率低,可以通过降低洗脱缓冲液的 pH 值(1.9~2.5)、增大洗脱缓冲液的离子强度(可选用2~3 M MgCl2)或延长洗脱时间,提高抗体的洗脱效率。但应注意抗体在低pH条件下容易形成聚集物,抗体洗脱产物应马上用碱性缓冲剂(如 Tris、HEPES 等)调节 pH 至中性。