花生凝集素单克隆抗体；花生凝集素抗体；花生凝集素抗原；pea

花生凝集素单克隆抗体；花生凝集素抗体；花生凝集素抗原；peanut agglutinin PNA抗体

PNA（PNA） 花生凝集素（peanut agglutinin;PNA）是从花生（Arachis hypogaea）籽中提取的由4个相同地亚基组成的一种凝集素。

花生凝集素（Peanut Agglutinin，简称 PNA）是一种从花生中提取的蛋白质，属于凝集素家族。
结构与性质
结构：花生凝集素是一种糖蛋白，由多个亚基组成。其亚基相对分子质量约为 30 - 40 kDa，通常以二聚体或四聚体的形式存在。它的结构中含有特定的糖结合结构域，能够特异性地识别和结合某些糖分子。
性质：花生凝集素具有较好的稳定性，在一定的温度和 pH 范围内能够保持其活性。它可溶于水，并且在溶液中能够保持其特定的空间结构和生物学活性。
生物学功能
细胞识别与黏附：花生凝集素能够识别并结合细胞表面的特定糖基化结构，介导细胞间的黏附作用。在胚胎发育过程中，它参与细胞的迁移和组织器官的形成；在免疫系统中，有助于免疫细胞之间的相互作用以及免疫细胞与病原体的识别和结合。
信号转导：与细胞表面受体结合后，花生凝集素可以激活细胞内的信号转导通路，调节细胞的生长、分化、凋亡等生理过程。例如，在某些癌细胞中，花生凝集素可能通过与癌细胞表面的特定糖蛋白结合，激活相关信号通路，促进癌细胞的增殖和转移。
参与炎症反应：在炎症过程中，花生凝集素可以与炎症细胞表面的糖分子结合，参与炎症细胞的募集和活化，从而在炎症反应中发挥重要作用。
应用领域
医学研究：作为一种生物探针，花生凝集素可用于研究细胞表面糖基化的变化。例如，在癌症研究中，通过检测肿瘤细胞表面花生凝集素结合位点的改变，有助于了解肿瘤细胞的糖基化异常，为癌症的诊断和治疗提供线索。此外，它还可用于研究免疫系统中细胞的活化和信号转导机制。
生物技术：在亲和层析中，花生凝集素可作为配体固定在层析介质上，用于分离和纯化含有特定糖基化结构的生物大分子，如糖蛋白、糖脂等。这种方法在生物制药、蛋白质组学等领域有着广泛的应用。
食品工业：花生凝集素可以作为一种天然的食品添加剂，用于改善食品的质地和稳定性。此外，由于它能够与某些微生物表面的糖分子结合，还可用于食品保鲜，抑制食品中微生物的生长和繁殖。

花生凝集素单克隆抗体是一种高度特异性的抗体：
制备
免疫动物：通常选择小鼠作为免疫对象。将花生凝集素与佐剂混合后，通过皮下注射、腹腔注射等方式免疫小鼠，使小鼠的免疫系统识别花生凝集素并产生免疫反应，生成针对花生凝集素的 B 淋巴细胞。
细胞融合：取免疫后的小鼠脾脏细胞（其中含有产生抗体的 B 淋巴细胞）与骨髓瘤细胞，在聚乙二醇（PEG）等融合剂的作用下进行细胞融合，形成杂交瘤细胞。这些杂交瘤细胞同时具备了 B 淋巴细胞产生特异性抗体的能力和骨髓瘤细胞无限增殖的特性。
筛选与克隆化：通过特定的筛选方法，如在含有次黄嘌呤 - 氨基蝶呤 - 胸腺嘧啶核苷（HAT）的培养基中培养，只有融合成功的杂交瘤细胞才能生长。然后利用酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法筛选出能够产生花生凝集素单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞。对阳性杂交瘤细胞进行克隆化培养，得到单个细胞的克隆，以确保产生的抗体具有高度均一性和特异性。
抗体生产：筛选出稳定分泌花生凝集素单克隆抗体的杂交瘤细胞株后，可通过体内培养（将细胞接种到小鼠腹腔内，形成腹水，从腹水中获取抗体）或体外培养（利用细胞培养技术在生物反应器中大量培养细胞，收集培养液获得抗体）的方法大量生产抗体。
特性
高度特异性：花生凝集素单克隆抗体能够特异性地识别花生凝集素，与其他类似的蛋白质或物质几乎不发生交叉反应，因此在检测和分析花生凝集素时具有很高的准确性。
高亲和力：它与花生凝集素具有较强的结合能力，能够快速、牢固地结合，即使在花生凝集素浓度较低的情况下也能有效地与之结合，从而实现对微量花生凝集素的检测和捕获。
均一性：由于是由单个杂交瘤细胞克隆产生的，单克隆抗体在氨基酸序列、结构和功能等方面具有高度的均一性，保证了实验结果的重复性和稳定性。
应用
免疫检测：可用于开发各种免疫检测方法，如 ELISA、免疫印迹（Western blot）、免疫组织化学（IHC）等，用于检测生物样本（如细胞裂解液、组织切片、血清等）中花生凝集素的表达水平、分布情况以及含量测定。例如，在研究花生过敏机制时，通过检测患者血清中花生凝集素的含量，有助于了解过敏反应的程度和机制。
细胞生物学研究：利用花生凝集素单克隆抗体可以研究细胞表面糖基化的变化。因为花生凝集素能够特异性结合细胞表面的某些糖基化结构，通过标记抗体并结合荧光显微镜等技术，可以观察细胞表面糖基化的动态变化，以及在细胞生长、分化、凋亡等过程中的作用。
亲和纯化：将花生凝集素单克隆抗体固定在固相载体（如琼脂糖凝胶、磁性微球等）上，制备成亲和层析介质，用于从复杂的生物样品中纯化花生凝集素或与花生凝集素相互作用的蛋白质。这种方法可以有效地富集和分离目标蛋白，为后续的结构和功能研究提供纯净的样品。