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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海笃玛生物科技有限公司
- 库存:
现货
- 样本:
血清 血浆 尿液 组织 脑脊液等
- 适应物种:
兔
- 应用:
科研实验
- 检测方法:
ELISA
- 检测范围:
电询
- 规格:
96T/48T
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往 预先包被免疫球蛋白M(IgM)抗体的包被微孔中,依次加入标本、 标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显 色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成 最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白M(IgM)呈正相关。 用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细 胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心 地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟 取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存 于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的 浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解 后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保 存。
3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明 书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
兔多配体聚糖3(SDC3)ELISA试剂盒
试剂盒组成
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12 孔×8 条 | 12 孔×4 条 | 无 |
| 标准品 | 0.3ml*6管 | 0.3ml*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6ml | 3ml | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10ml | 5ml | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15ml | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6ml | 3ml | 无 |
| 底物B | 6ml | 3ml | 无 |
| 终止液 | 6ml | 3ml | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤 缓冲液加 19 份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽 孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5 次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。

操作步骤
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自 封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μ L;
3. 样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;空白孔不 加。 4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶 (HRP)标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅 或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去 洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
结果判断
绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样 本浓度值。

试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于 0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度小于 0.1 g/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所 产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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文献和实验分装 兔细胞因子 >>> 分装ELISA 试剂盒 货号 品名 方法 规格 价格 备注 F2000 兔I 型胶原 (rabbit Collagen I) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F2001 兔D2 聚体 (rabbit 2-Dimer) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F2002 兔E- 选择素 (rabbit E
因子 >>> 分装 ELISA 试剂盒 货号 品名 方法 规格 价格 备注 F00010 血管紧张素转化酶 (Human ACE) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F00020 激活素 A(Activin A) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F00021 雄激素结合蛋白 (ABP) ELISA 48T/96T 1800/2800 进口分装 F00022 促肾上腺皮质激素 (ACTH) ELISA 48T/96
ELISA 试剂盒 货号 品 名 规格 价格 备注 F0001 人血管紧张素转化酶(Human ACE) 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0002 激活素A(Activin A) 48T/96T 2000/3000 进口分装 F0003 ★ 人脂联素(human Adiponectin) 48T/96T 1500/2500 进口分装 F0004 白细胞活化黏附因子(ALCAM) 48T/96
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