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兔多配体聚糖3(SDC3)ELISA试剂盒

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  • DM-R14067
  • 上海
  • 2025年09月13日
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      上海笃玛生物科技有限公司

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    • 样本

      血清 血浆 尿液 组织 脑脊液等

    • 适应物种

    • 应用

      科研实验

    • 检测方法

      ELISA

    • 检测范围

      电询

    • 规格

      96T/48T

     兔多配体聚糖3(SDC3)ELISA试剂盒  

    检测原理
    试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往 预先包被免疫球蛋白MIgM)抗体的包被微孔中,依次加入标本、 标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显 色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成 最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白MIgM)呈正相关。 用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

    样品收集、处理及保存方法
    1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细 胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心 地分离。 
    2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
    3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。 
    4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟 取上清。
    5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存 于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    自备物品 
    1. 酶标仪(450nm) 
    2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 
    3. 37℃恒温箱 

    操作注意事项 
    1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的 浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解 后再使用。
    2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保 存。
    3. 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明 书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。
    4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
    5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
     产品细节图片1

     兔多配体聚糖3(SDC3)ELISA试剂盒
    试剂盒组成 
    名称 96孔配置 48孔配置 备注
    微孔酶标板  12 孔×8 条 12 孔×4 条
    标准品 0.3ml*6管 0.3ml*6管
    样本稀释液 6ml 3ml
    检测抗体-HRP 10ml 5ml
    20×洗涤缓冲液 25mL 15ml 按说明书进行稀释
    底物A 6ml 3ml
    底物B 6ml  3ml
    终止液 6ml 3ml
    封板膜 2张 2张
    说明书 1份 1份
    自封袋 1个 1个
    注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、1.25、2.5、5、10、20 g/L 

    试剂的准备 
    20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的 20×洗涤 缓冲液加 19 份的蒸馏水。 

    洗板方法 
    1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽 孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5 次。 
    2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5 次。 
    产品细节图片2
    操作步骤 
    1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自 封袋密封放回 4℃。 
    2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μ L; 
    3. 样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;空白孔不 加。 4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶 (HRP)标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅 或恒温箱温育 60min。 
    5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去 洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。 
    6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 
    7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。 

    结果判断 
    绘制标准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样 本浓度值。 
    产品细节图片3
    试剂盒性能 
    1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于 0.9900。 
    2. 灵敏度:最低检测浓度小于 0.1 g/L。 
    3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 
    4. 重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。
    5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
    6. 有效期:6 个月 

    免责声明 
    1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所 产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。 
    2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。



     

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