手机验证
2-8°C
6个月
Soil Free Amino Acid (S-FAA) Content Assay Kit
999
北京索莱宝科技有限公司
BC5095-100T/96S
100T/96S
土壤游离氨基酸(S-FAA)含量检测试剂盒说明书
微量法
货号:BC5095
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体110 mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体12 mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体15mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
试剂四 |
粉剂×2支 |
2-8℃保存 |
标准品 |
粉剂×1瓶 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂四:临用前取1支加1 mL蒸馏水,充分溶解,用不完的试剂-20℃分装保存2周;(1支粉剂溶解后可做100T,为了延长使用时间,此产品多给1支粉剂)
2、 标准品:10 mg半胱氨酸。临用前加入4.13 mL蒸馏水,得到20 μmol/mL的半胱氨酸标准溶液备用,用不完的试剂可以2-8℃保存4周。
产品说明:
作为土壤中一类重要的化合物,氨基酸占土壤中全氮的15%-60%,是土壤氮素循环和植物养分供给过程中重要的“库”和“源”,可通过矿化作用满足作物氮素营养的需求,也可以被植物直接吸收利用。另外,氨基酸也是土壤微生物重要的氮源,对于土壤微生物群落结构、数量和活性均有直接影响。因此,研究土壤中氨基酸含量变化规律,对研究土壤氮素循环,及其对植物生理生态变化的影响均有重要意义。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应在570nm有特征吸收峰;通过测定570nm吸光度,来计算氨基酸含量。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、30-50目筛、无水乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、 样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
土样37℃/自然风干后过30-50目筛,称取约0.15g土样,加试剂一1mL,振荡2h,10000rpm离心10min,取上清液,待测。
二、测定步骤
1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至570nm,蒸馏水调零。
2. 标准品稀释:取60μL 20μmol/mL 标准液加入140μL蒸馏水得6μmol/mL标准溶液进行实验。
3. 操作表:(在EP管中进行)
试剂名称(μL) |
测定管 |
标准管 |
空白管 |
样本 |
40 |
- |
- |
标准品 |
- |
40 |
- |
蒸馏水 |
- |
- |
40 |
试剂二 |
100 |
100 |
100 |
试剂三 |
100 |
100 |
100 |
试剂四 |
10 |
10 |
10 |
混匀后盖紧瓶盖(缠封口膜防止水分散失),置于沸水浴中保温15min,冷却后反复颠倒EP管数次,8000rpm离心5min后取上清,于570nm测定吸光值,分别记为A测定管、A标准管、A空白管,并计算ΔA测定管=A测定管-A空白管,ΔA标准管=A标准管-A空白管,显色后务必在30min内测完。标准管、空白管只需做1-2次。
三、S-FAA含量计算
S-FAA含量(μmol/g 土样)=(C标准品×V标准品×ΔA测定管÷ΔA标准管)÷(V样÷V样总×W)
= 6×ΔA测定管÷ΔA标准管÷W
C标准品:标准品浓度,6μmol/mL;V标准品:反应体系中加入标准品体积,0.04mL;W:样本质量,g;V样:反应体系中加入样本体积,0.04mL;V样总:样本总体积,1mL。
注意事项:
1、 试剂四均需临用前配制,且避光保存。
2、 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应在570nm处无吸收峰,因此,570nm处测定结果不含这两种氨基酸的量。
3、 如果ΔA测定管大于1,建议将样本上清液用试剂一稀释后进行测定。
实验实例:
1、 取0.15g土样加入1mL试剂一进行样本处理,取上清后按照测定步骤操作,使用96孔板测得A测定管=0.304、A标准管=0.603、A空白管=0.064,计算ΔA测定管=A测定管-A空白管=0.304-0.064=0.240,ΔA标准管=A标准管-A空白管=0.603-0.064=0.539,按样本质量计算含量得:
S-FAA(μmol/g土样)=6×ΔA测定管÷ΔA标准管÷W=6×0.240÷0.539 ÷0.15=17.811 μmol/g 土样。
参考文献:
[1] Wang X, Cui X Y, Guo Y F A study on free amino acid in different forest types soil of cold-temperate forest region[J]. Journal of Nanjing Forestry University (Natural Science Edition), 2016, 59(04): 42-48.
[2] Wang B, Jiang Y Y, Jiao J G, et al. Effects of earthworm on constituent and amount of amino acid in soil[J]. Acta Ecologica Sinica, 2015,35(14):4816-4823.
[3] Zhang X J, Wang W Y, Li W Q, et al. Dynamics of soil dissolved organic nitrogen in alpine meadow[J]. Journal of Lanzhou University: Natural Sciences, 2016, 52(5):623-627.
相关系列产品:
BC0040/BC0045 土壤硝态氮含量检测试剂盒
BC1510/BC1515 土壤铵态氮含量检测试剂盒
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
AuthorChen Jing, Zhang Dongdong, Yang Rui, Lin Wei, Wang Hong, Kang Ying, Qi Zhiyong, Zhou Wanlai
|
Publish_toBiomass Conversion and Biorefinery
|
IF4.0000
|
PMID
|
需要更多技术资料 索取更多技术资料