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Soil Available Potassium Assay Kit
999
北京索莱宝科技有限公司
BC3040-50T/24S
50管/24样
货号:BC3040
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
提取液 |
液体70mL×1瓶 |
常温保存 |
试剂一 |
液体4mL×1瓶(自备) |
常温保存 |
试剂二 |
液体5mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三A |
液体15.3mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三B |
粉剂×2瓶 |
2-8℃保存 |
试剂四 |
液体42mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
液体1mL×1支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 提取液:若试剂有晶体析出,37℃水浴溶解即可。
2、 试剂一:自备,甲醛。
3、 工作液:临用前在1瓶试剂三B中加入4.08mL试剂三A,充分溶解,现配现用,用不完的试剂2-8℃保存一周(每瓶配好的工作液可做22管样本测定管试验)。
4、 标准液:20 μmol/mL钾标准液。
产品说明:
速效钾是土壤中易被植物吸收利用的钾素,是表征土壤钾素供应状况的重要指标之一。及时测定和了解土壤速效钾的含量及其变化,对耕地地力评价及对指导钾肥的施用有着重要作用。
钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的白色四苯硼钾沉淀,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比,通过检测其在420nm处的浊度来测定土壤速效钾的含量。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、振荡器、1mL玻璃比色皿、研钵、30-50目筛、甲醛(不允许快递)、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样风干,过30-50目筛。按照土壤质量(g): 提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约0.2g土样,加入1mL提取液),振荡提取1h,10000rpm,25℃离心10min(若离心后上清中仍有杂质,建议将上清再次离心,至澄清),取上清液待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至420nm,蒸馏水调零。
2、 临用前将20 μmol/mL钾标准液用提取液稀释至1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL的标准液待测。
3、 准液稀释可参考下表:
序号 |
稀释前浓度(µmol/mL) |
标准液体积(µL) |
提取液体积(µL) |
稀释后浓度(µmol/mL) |
1 |
20 |
100 |
900 |
2 |
2 |
2 |
120 |
80 |
1.2 |
3 |
2 |
500 |
500 |
1 |
4 |
1 |
160 |
40 |
0.8 |
5 |
1 |
120 |
80 |
0.6 |
6 |
1 |
80 |
120 |
0.4 |
7 |
1 |
60 |
140 |
0.3 |
8 |
1 |
40 |
160 |
0.2 |
备注:实验中每个标准管需要120μL标准液。
4、 在EP管中进行以下操作(试剂一为有刺激性气味的有毒物质,建议以下试验在通风橱中操作):
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
空白管 |
标准管 |
样本(μL) |
120 |
120 |
- |
- |
提取液(μL) |
- |
- |
120 |
- |
标准液(μL) |
- |
- |
- |
120 |
试剂一(μL) |
60 |
60 |
60 |
60 |
涡旋混匀,室温静置5min。 |
||||
试剂二(μL) |
60 |
60 |
60 |
60 |
工作液(μL) |
180 |
- |
- |
180 |
试剂三A(μL) |
- |
180 |
180 |
- |
试剂四(μL) |
580 |
580 |
580 |
580 |
涡旋混匀,常温静置5min,于1mL玻璃比色皿中测定420nm处吸光值,分别记为A测定、A对照、A空白、A标准。计算ΔA测定=A测定-A对照,ΔA标准=A标准-A空白。空白管和标准曲线只需做1-2次。 |
三、速效钾含量计算
1、标准曲线的绘制:根据标准管的浓度(x,μmol/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,μmol/mL)。
2、速效钾含量计算:
速效钾含量(mg/kg)=x×10-3 ×V样总÷W×39=0.039x ÷W
10-3:单位换算系数,1μmol=10-3 mmol;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样本质量,kg;39:钾离子的相对分子质量。
注意事项:
1. 甲醛为有刺激性气味的有毒物质,建议本试验在通风橱中操作。
2. 提取液刚从低温(4℃)条件取出会有晶体析出,震荡使其溶解即可
3. 当A测定大于1时,建议将样本用提取液稀释后再进行测定,计算时需在公式中乘以相应稀释倍数;当A测定小于0.1时,建议适当增加土壤样本质量或减少提取液重新提取后再进行测定。
实验实例:
1、 取0.2g土样1加入1mL提取液,振荡提取1h,取上清按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.173-0.017=0.156,根据标准曲线y=0.8242x-0.0461,计算x=0.245μmol/mL,按样本质量计算速效钾含量得:速效钾含量(mg/kg质量)=0.039x ÷W=0.039×0.245÷0.0002=47.775 mg/kg质量。
2、 取0.2g土样2加入1mL提取液,振荡提取1h,取上清按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.889-0.003=0.886,根据标准曲线y=0.8242x-0.0461,计算x=1.131μmol/mL,按样本质量计算速效钾含量得:速效钾含量(mg/kg质量)=0.039x ÷W=0.039×1.131÷0.0002=220.545 mg/kg质量。
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