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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
157
- 样本:
血清、血浆及相关液体样本
- 标记物:
详见操作说明
- 适应物种:
人、大鼠、小鼠、植物、动物等
- 应用:
仅供科研实验
- 检测方法:
双抗体夹心法
- 检测范围:
详见操作说明
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)酶联免疫分析试剂盒
Mouse LDL-IC ELISA KIT
产品优势
公司销售的所有产品均配有产品说明、技术资料。我们拥有稳定的科研队伍、先进的实验设备。将针对您的应用需求,为您提供专门的服务。高品质的ELISA试剂盒让您的实验结果更具科学性、准确性、专业性。将节省您大量的时间和精力更好地投入到实验工作中。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)表达。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
实验所需自备试验器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒操作步骤
A.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
B.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
C.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
D.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
E.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
F.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
G.温育:操作同3。
H.洗涤:操作同5。
I.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
J.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
K.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)酶联免疫分析试剂盒仅供科研实验!
实验结果计算
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
实验时出现的问题描述及解决方案
问题描述:变异系数大
可能原因:加液不正确
相应对策:检查加液情况
问题描述:背景值高
可能原因:检测抗体的工作浓度
酶标版洗涤不完全
洗液有污染
相应对策:使用推荐的稀释倍数
重新阅读操作手册,保证清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞
配置新鲜的洗液
试剂盒性能:请向客服人员索要详细电子版说明书!
小鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)酶联免疫分析试剂盒
产品保存温度:2-8℃
产品有效期:6个月
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文献和实验免疫复合物(immunecomplex,IC)或抗原抗体复合物是抗原与其对应抗体相结合的产物。在正常情况下,机体内的游离抗原与相应抗体结合形成IC,可被机体的防御系统清除,作为清除异物抗原的一种方式,对机体有利。但在某些情况下,体内形成的IC不能被及时清除,则可在局部沉积,通过激活补体,并在血小板、中性粒细胞等参与下,引起一系列连锁反应而导致组织损伤,出现临床症状,称为免疫复合物病(immunocomplexdisease,ICD)。 由于抗原与抗体比例不同,所形成的IC分子大小各异,通常
:①敏感性高,②特异性强,可重复性好,④操作简便,⑤适用面广。目前检测免疫复合物的方法虽发展到几十种,但还没有一种方法具备上述所有的特点,综合相比之下,C1q结合试验、胶固素结合试验、Raji细胞试验和RF抑制试验等方法比较好些。如果方法得当、试剂合格、标本新鲜、操作小心、分析谨慎、CIC测定就会有较大的参考价值。 二、组织固定免疫复合物的检测 确定免疫复合物病的直接证据不是检出CIC,而是在病变部位查到固定的IC沉积。在一些自身免疫病和免疫复合物病,例如系统性红斑狼疮、部分肾小球肾炎、类风
免疫复合物清除作用 补体在活化过程中生成的中间产物,例如C3b和C4b等,对抗原抗体复合物有很强的亲和力,可共价结合到免疫复合物上,然后通过补体的其他效应对免疫复合物产生抑制或清除作用。 1.吞噬调理作用人及哺乳类动物的单核-巨噬细胞和中性粒细胞表面都在C3b和C4b受体,能与带有补体成分的免疫复合物相结合,将两者连接起来,促进吞噬细胞对免疫复合物的吞噬作用。在这种意义上,补体也可称为非特异性调理素医学教|育网搜集整理(opsonin)。补体成分C3b、C4b、iC
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