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文献和实验个能与唯一的因子结合位点偶联。 What to use them for:筛选转录因子的表达 Pros(优点):提供一种广泛相对无偏见的第一次筛选手段,理论上,一次能检测100种不同转录因子。 Cons(缺点):需要特定的硬件设施(如Luminex reader),不能完全的解释哪一种蛋白与哪一种蛋白结合。 Things to keep in mind:像RNAse保护试验一样,磁珠系统能定量转录因子保护寡核苷酸不被消化的能力。来自匹兹堡大学医学中心Luminex
相关专题 磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。 磁珠法 纯化DNA原理 磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃
切片样品,使用胃蛋白酶(500μg/ml,溶于200mM HCl)将得到较好的蛋白消化结果。对于结缔组织,肝组织等样品,还可进行Collagenase和Dispase的组织消化处理,以降低背景。3. 探针制备在进行研究前,确定应用的探针类型。不同探针类型的优劣势请见上文描述。DNA探针的制备包括了前期的DNA片段分离纯化(或cDNA的克隆)和酶促探针标记,可选随机引物标记法和缺口平移法等。RNA探针的制备包括了转录载体克隆和转录法探针标记。寡核苷酸探针的制备要求先获得合成的寡核苷酸片段
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