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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
111
- 样本:
血清、血浆及相关液体样本
- 标记物:
详见操作说明
- 适应物种:
人、大鼠、小鼠、植物、动物等
- 应用:
仅供科研实验
- 检测方法:
双抗体夹心法
- 检测范围:
详见操作说明
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)酶联免疫分析试剂盒
Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC ELISA KIT
产品优势
公司销售的所有产品均配有产品说明、技术资料。我们拥有稳定的科研队伍、先进的实验设备。将针对您的应用需求,为您提供专门的服务。高品质的ELISA试剂盒让您的实验结果更具科学性、准确性、专业性。将节省您大量的时间和精力更好地投入到实验工作中。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)表达。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
实验所需自备试验器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒操作步骤
A.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
B.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
C.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
D.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
E.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
F.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
G.温育:操作同3。
H.洗涤:操作同5。
I.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
J.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
K.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)酶联免疫分析试剂盒 仅供科研实验!
实验结果计算
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
实验时出现的问题描述及解决方案
问题描述:变异系数大
可能原因:加液不正确
相应对策:检查加液情况
问题描述:背景值高
可能原因:检测抗体的工作浓度
酶标版洗涤不完全
洗液有污染
相应对策:使用推荐的稀释倍数
重新阅读操作手册,保证清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞
配置新鲜的洗液
试剂盒性能:请向客服人员索要详细电子版说明书!
人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)酶联免疫分析试剂盒
产品保存温度:2-8℃
产品有效期:6个月
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文献和实验免疫球蛋白的组合多样性 胚系未重排基因中有众多的V、D、J基因片段,在重排过程中可以有各种组合。在人免疫球蛋白基因的重排中,就VH而言有65个功能性VH 基因片段,27个D基因片段,6个JH 基因片段,这样就有65× 27× 6=1l 000种VH;人的κ轻链约有40个功能性Vκ基因片段,5个Jκ基因片段,这样就有200种不同的Vκ。 对λ轻链而言,约有30个VL片段和4个Jλ,组合起来有120种不同的Vκ;因此,就VL加起来就共有320余种。轻重链之间
抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig 分五类,即 IgG、IgA、IgM、IgD 和 IgE。与免疫测定有关的 Ig 主要为 IgG 和 IgM。Ig 由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig 的轻链是相同的,有 κ(kappa)和 λ(Lambda)两种型别。五类 Ig 的重链结构不同,这决定了它们的抗原性也不同。IgG 和 IgM 的重链分别称为 γ(gamma)链和 μ(mu )链。 重链和轻链的 N 端的氨基酸排列顺序
免疫球蛋白轻链和重链 【参考范围】免疫电泳法:正常为阴性。 免疫速率散射比浊法(ARRAY-360测定仪参考值):Kappa链血清0.598~1.329g/L;尿液<18.5mg/L;Lambda链血清0.280~0.665g/L;尿液<500mg/L;Kappa/Lambda血清1.47~2.95. 【影响因素】1.免疫电泳法标本要新鲜不可污染或有沉淀,否则电泳时会出现拖尾现象;用抗κ或抗λ血清电泳时,其中一种抗血清有时出现2条沉淀线,是靠近加样孔较粗的为骨髓
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