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信帆生物
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概要
赭曲霉毒素A由 A-spergillus 和 Penicillium 两类霉菌产生,除明显的肾毒性外,赭曲霉毒素A还表现出肝毒性、致畸性、致癌性和免疫抑制性等特性。对人体健康而言,危害不仅来源于污染的植物性食品,也通过动物性食品的摄入。我国规定谷物、豆类及其制品中赭曲霉毒素A不得超过5μg/kg,欧盟规定谷物、豆类及其制品中赭曲霉毒素A不得超过3μg/kg。
原理
测定的基础是抗原-抗体反应。微孔板上包被有抗抗体。加入赭曲霉毒素A(OTA)标准品或样品、酶标抗原和抗体后,游离的赭曲霉毒素A与酶标抗原竞争结合抗体,抗体或抗体结合物与固定在微孔板上的抗抗体再结合,没有结合的标准品、酶标抗原及抗体被洗去,加入TMB底物显蓝色,加入终止液后颜色由蓝变黄,用酶标仪在450nm处检测,吸光值与样品中赭曲霉毒素A含量成负相关,与标准曲线比较即可得出赭曲霉毒素A的含量。
3. 试剂盒组成
包被有抗抗体的96微孔板:1块(96孔,12条×8 孔)
OTA标准品:0 ppb、0.2 ppb、0.8 ppb、3.0 ppb、10 ppb 1 瓶 × 1.0mL
OTA抗体: 1 瓶 × 10mL
OTA酶标抗原: 1 瓶 × 10mL
10× 浓缩洗涤液: 1 瓶 × 50mL
OTA稀释缓冲液: 1 瓶 ×50mL
显色底物液: 1 瓶 ×17mL
反应终止液: 1 瓶 × 7mL
试剂盒说明书
质检报告
需要的仪器、试剂
1)仪器
酶标仪450nm(iELisa全自动酶标仪或相当者)
微量移液器:20μL-200μL单道,100μL-1000μL单道, 50μL-300μL八道
多功能旋转混合器(或者摇床、高速均质器)
酶标板振荡器
涡旋混合器
50mL离心管
1.5mL离心管
定性滤纸
过滤漏斗
天平:感量0.01g
2)试剂
样品提取液70%甲醇:取700mL甲醇,加300mL纯水,混匀。
纯水(蒸馏水、去离子水)
注意事项
室温低于20℃或试剂及标本未回到室温(20- 25℃)会导致数值偏低。
在洗板过程中如果出现板孔干燥过久的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即进行下一步操作。
标准物质和显色液对光敏感,避免直接暴露在光线下。
混合要均匀,洗板要*(包括加样品和标准液的时候都必需充分混合均匀)。
反应停止液为强酸性物质,避免接触皮肤。
不要使用过了有效期的试剂盒,也不要稀释或搀杂使用不同生产厂家的试剂盒这样会引起灵敏度降低。
试剂盒的储存条件是2-8℃,切勿冷冻。
9.赭曲霉毒素A检测试剂盒检测方法灵敏度、准确度、精密度
检测限LOD: 谷物1ppb(μg /kg),饲料2.5ppb尿液1.0。(LOD:空白样品测定值+2倍标准偏差SD)
定量限LOQ: 谷物2ppb,饲料5ppb,尿液1.5ppb。
定量检测范围:谷物2-50ppb,饲料5-125ppb,饲料1.5-25ppb。
赭曲霉毒素A检测试剂盒
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文献和实验法。Charm Rosa 霉菌毒素定量检测系统能够在5分钟内快速定量测定粮食及其制品中的多种霉菌毒素,包括黄曲霉毒素、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素 A、伏马菌素和T2/HT2 毒素。Charm Rosa 霉菌毒素检测系统组成Charm Rosa(Rapid One Step Assay)霉菌毒素检测系统由检测条、孵育器和读数仪三部分组成。其中检测条采用3线设计,包括 2 条检测线(T 线)和 1 条质控线(C 线),这样便于准确定量,并增加动态检测范围,因此检测范围较其它胶体金检测条更宽;另外,检测条
致突变物质也是致癌物质。我国用此法测出食管癌高发区的河南人吃的酸菜水中有致突变物质,怀疑它对食管癌有致癌作用。至于霉菌毒素,特别是黄曲霉毒素,有强的致癌变、致突变和致畸变作用(简称“三致”),也都是通过微生物实验得出的结果。国外有人发现香烟浓缩物中有十多种可诱发致突变的物质,并从0.01支香烟提取的浓缩物中就可检出。用Ames氏法检查,发现吸烟者尿中提取物也有致突变性物质,这有力地证明了流行病学研究出的关于吸烟同引起多种病和多种癌症的危险性增加的结论。日本研究食物添加剂呋喃糠酰胺(过去用它加入香肠
因含有禽流感病毒而受阻;酱油由于氯丙醇污染问题而影响了向欧盟和其他国家出口。为了解决出口食品受阻和严格控制有害进口食品进入国门,保证人民的身体健康,必须找到灵敏准确的检测方法。TRFIA 是随着免疫分析和化学分析的发展而成孰起来的一种新的检测方法。作为一种灵敏度高、特异性好、安全的超微量分析测定方法,目前已广泛而成熟地应用在临床医学领域,同时也在食品安全领域崭露头角,用于快速检测食品中的大肠杆菌O157:H7、赭曲霉毒素A 、微囊藻毒素和有害金属等。相信随着检测设备的广泛应用和各种检测试剂盒的不断
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