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Monoclonal antibodies and virus
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费雪医学研究有限公司
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500μg

500μg;抗犬腺病毒1型单克隆抗体;抗犬腺病毒2型单克隆抗体;犬腺病毒抗体;犬CAV抗体
Monoclonal antibodies and virus
犬腺病毒主要蛋白概述:
六邻体蛋白(Hexon):腺病毒主要的中和抗原表位位于六邻体蛋白的 Loop1、Loop2 上。目前对于人腺病毒的该蛋白研究较多,而对于犬传染性肝炎病毒(即犬腺病毒 Ⅰ 型)的研究相对较少。参考 Genebank 发表的基因序列设计引物,提取犬传染性肝炎病毒基因组 DNA,分别 PCR 扩增六邻体蛋白的 Loop1、Loop2 基因片段,用 T4 酶连接在一起,克隆入原核表达载体 pET28a 中。测序显示保存病毒分离株 Loop1 与 CLL 株、RI261 株和 Toronto A26/61 株核苷酸序列同源性分别为 100%、100% 和 83.8%;Loop2 与 CLL 株、RI261 株和 Toronto A26/61 株核苷酸序列同源性分别为 88.1%、88.1% 和 99.3%,推导的氨基酸序列同源性分别为 93.6%、93.6% 和 98.6%。转化 BL21 工程菌,实现了重组 Loop 蛋白在大肠杆菌中的高效表达,分子量约为 36kDa,并且利用镍柱纯化重组蛋白,纯度达 95% 以上。用重组蛋白免疫 BALB/c 小鼠后,以间接 ELISA 法测定血清抗病毒抗体效价达 1:320 以上,western blot 鉴定免疫血清与犬传染性肝炎病毒特异性结合8。
纤维蛋白(Fiber):是犬腺病毒 Ⅰ 型(CAdV-1)的结构蛋白之一,介导病毒粒子与宿主细胞上的柯萨奇病毒和腺病毒受体结合。成功分离出 CAdV-1-JL2021 株,与在意大利流行的 CAdV-1 株最为相似。CAdV-1-JL2021 和 CAdV-2-AC_000020.1 中发现了负选择和重组的发生。其亚细胞定位在宿主细胞膜。CAdV-1-JL2021 Fiber(ON164651)有 6 个糖基化位点和 107 个磷酸化位点,与 CAdV-2-AC_000020.1 Fiber 一样,通过粘附受体介导病毒粒子与宿主细胞的附着。CAdV-1-JL2021 和 CAdV-2-AC_000020.1 的 Fiber 三级结构不同,但它们具有相同的柯萨奇病毒和腺病毒受体。“VATTSPTLTFAYPLIKNNNH” 被预测为潜在的 CAdV-1 B 细胞线性表位。MHC-I 结合肽 “KLGVKPTTY” 在 CAdV-1-JL2021 和 CAdV-2-AC_000020.1 Fiber 中均存在,这对于设计犬腺病毒疫苗很有帮助

- 抗犬腺病毒1型单克隆抗体;抗犬腺病毒2型单克隆抗体;犬腺病毒抗体;犬CAV抗体
- 品牌:PhyCell/费雪
规格:0.5mg,1mg
该抗体可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。
可用于免疫荧光,WB,ELISA,等科研项目
纯度>95%
推荐使用浓度: 胶体金: 5微克/ml金液;
ELISA: 1:2000-1:5000
WB及免疫组化,免疫荧光:1:50-1:500
标记二抗的使用浓度:国产1:100-1:500;进口1:1000-1:5000
纯化方式:亲和层析纯化
来源: balb/c小鼠
缓冲液:0.01PBS+保护剂
储存:-20℃,避免反复冻融
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文献和实验抗体的检测外,还应该用与其抗原成分相关的其它抗原进行交叉试验,方法可用ELISA、IFA法。例如:①制备抗黑色素瘤细胞的McAb,除用黑色素瘤细胞反应外,还应该用其它脏器的肿瘤细胞和正常细胞进行交叉反应,以便挑选肿瘤特异性或肿瘤相关抗原的单克隆抗体。②制备抗重组的细胞因子的单克隆抗体,应首先考虑是否与表达菌株的蛋白有交叉反应,其次是与其它细胞因子间有无交叉。 2.McAb的Ig类与亚类的鉴定 一般在用酶标或荧光素标记的第二抗体进行筛选时已经基本上确定了抗体的Ig类型
一、传染性犬肝炎 传染性犬肝炎(ICH)是由犬腺病毒1型(CAV-1)引起的一种急性败血性传染病。以肝小叶中心坏死、肝实质细胞和皮质细胞核内出现包涵体和出血时间延长为特征。CAV-1按其构造和生物学特征属于腺病毒一类,各国分离的毒株都相同。根据电子显微镜观察,这种含脱氧核糖核酸的病毒为有252个壳粒的20面体,有衣壳,直径为70-80nm。这种病毒可以在鸡胚和组织(幼犬的肾上皮细胞和其它组织、雪貂、仔猪、猴、豚鼠和仓鼠的肾上皮细胞、仔猪的肺组织)中培养。在肝细胞内和内皮细胞内产生特征性核内
淋巴细胞,经一定时间作用后,CTL被活化,收集培养上清液,加入含DTNB的缓冲液(底物为BLT),采用分光光度计检测酶的活性,并计算抗TCR诱导的酯酶释放百分率。 二、试剂及材料 1. pH7.2~7.4磷酸盐缓冲液(PBS); 2. 抗TCR单克隆抗体(用PBS配成5μg/ml) 3. BLT底物溶液:临用前配制:500μl20mmol/LN-α-苯氧羰基-L-赖氨酸硫代苯甲酯(BLT)贮存液,500μl 22mmol/L 的5,5二硫对硝基苯甲酸(DTNB)贮存液,500μl1%
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