Cell lysis buffer for WB and I
P without inhibitors-Cell lysis buffer for WB and IP without inhibitors- ￥33
- APExBIO
- 美国
- APE-K1124-100
- 2025年07月12日
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Cell lysis buffer for WB and IP without inhibitors
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艾美捷科技
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无
- 规格：
100ml
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Cell lysis buffer for WB and IP without inhibitors-Cell lysis buffer for WB and IP without inhibitors
产品货号：APE-K1124-100
产品规格：100ml
高效的组织或细胞裂解液
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文献和实验: 2X Lysis Buffer (~500 l)/ 1X PBSSample Prep -- (a)IP: add (40 l)2X Sample Buffer (1X V PrA/S)-- (b)W: add (50 l)3X Sample BufferBoil 5'Run Gel -- 100 V through Stacking100 00 V after (in Separating)Prepare Transfer -- make fresh TB: 1L= 200ml 5X TBb
液，三个一起上 从以上三个结果可以看到，第一种孵育方法抗原得率最高，第三种抗原得率最低。如果靶蛋白丰度较高，第一种和第二种差别并不显著。注意，整个体系选择同样的孵育顺序，以确保结果的重复性。 5、各种 buffer 整个 co-IP 系统，涉及到裂解液，结合液，洗涤液，洗脱液，这4种溶液要如何考量呢？ 裂解液---样本质量很大程度受限于裂解液，要考虑其中的去垢剂种类。 非变性裂解液，含有非离子型去垢剂，有助于稳定天然蛋白构象，比如 IP lysis buffer。不建议使用变性裂解
，相对麻烦。实际上，如果你不是非常强调蛋白的分泌有什么生理功能，一般不建议检测上清，尤其半定量的WB实验检测不同样品间的差异。这里面有实验操作细节的麻烦——经验之谈，我曾经参与的cancer cell文章所研究的蛋白就是分泌型蛋白，但90%的数据是cell lysis；偶尔用到上清，也只是作为富集纯化该蛋白的原料，为进一步分析做准备。样品制备完，应立即低温保存（-20度短期（几天）；-80度长期；例外，IP用样品应直接进行IP，避免冻融破坏蛋白质间弱的相互作用）。SDS LB煮沸过的样品冻融会存在
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