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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
60
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮样 ,不规则细胞
- 物种来源:
大鼠
- 组织来源:
口腔黏膜组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 细胞名称 | 大鼠口腔黏膜上皮细胞 | 组织来源 | 口腔黏膜组织 |
| 商品货号 | YS-01X8195 | 种属来源 | 大鼠 |
| 包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
| 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮样 ,不规则细胞 |
| 传代特性 | 根据细胞特性 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 原代上皮细胞培养体系 | 培养条件 | 气相:空气 ,95%; CO2 , 5% |
| 细胞简介 |
| 口腔上皮细胞是一种上皮细胞。人的口腔上皮细胞是扁平、多边形的 ,形状不很 规则。 口腔各壁都有黏膜覆盖。 口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部。 上皮的垂直切面上 ,细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状 ,为具有 增殖分化能力的干细胞 ,部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞 ,再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状 ,基底层细胞能不 断分裂增生 ,以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织 内有丰富的毛细血管 ,有利于复层扁平上皮的营养。 |
质量检测:实验室分离的大鼠口腔黏膜上皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠口腔黏膜上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,大鼠口腔黏膜上皮细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠口腔黏膜上皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮样 ,不规则细胞 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品:
| 人小细胞肺癌细胞;DMS153 | HRAS样抑制因子3封闭多肽 |
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| 人乳腺癌细胞(上皮粘性蛋白基因修饰);Ecad231-7 | 溶质载体家族25成员39封闭多肽 |
| 猪肾传代细胞;IBRS-2 | PTCD2蛋白封闭多肽 |
| 小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP | 胰岛素样生长因子结合蛋白5封闭多肽 |
| 小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFP | 锌指蛋白769封闭多肽 |
| 人乳腺上皮细胞;MCF-10A | 血小板膜糖蛋白Ⅱb封闭多肽 |
| 人乳腺癌细胞(红色荧光蛋白标记);MDA-MB-231-Red3 | 组蛋白H3-K9甲基转移酶封闭多肽 |
| 人结肠癌细胞;NCI-H508 | 脂肪酸转运蛋白5封闭多肽 |
| 小鼠前胃癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP | 大鼠口腔黏膜上皮细胞卷曲螺旋结构域蛋白135封闭多肽 |
| 正常大鼠肾细胞;NRK | 无精症缺失基因4封闭多肽 |
| 正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F | 乙酰化组蛋白H1b封闭多肽 |
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文献和实验实验材料: 1. 新生大鼠唾液腺; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:DMEM培养液,添加10%的胎牛血清、5μg/ml胰岛素、10 ng/ml表皮生长因子、50 ng/ml氢化可的松、100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。无Ca2+ 、Mg2+ 的D-Hanks液,使用时添加100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素; 4. 鼠尾胶原液:先吸取4ml
本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结,请分享! 取材:1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法): ①取 Wistar 大鼠断颈法处死,立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台,取腰部切口迅速取出肾脏,置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上,剪碎成1-2mm3大小组织块,网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
实验材料: 1. 正常大鼠的肺组织; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 肺泡灌洗液Ⅰ:140 mmol/L NaCl、5 mmol/L KCl、2.5 mmol/L磷酸缓冲液、10 mmol/L HEPES、6 mmol/L葡萄糖和0.2 mmol/L EDTA。用无菌双蒸水配制,pH7.4,肺泡灌洗液使用时须预温到37℃; 4. 肺泡灌洗液Ⅱ:在灌洗液Ⅰ中加入2.0 mmol/L
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