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人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞
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否
上海研生
55
贴壁
成纤维样细胞
人
患类风湿性关节炎病人的关节滑膜组织
5×10⁵Cells/T25培养瓶
基本信息:细胞名称:人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞组织来源:患类风湿性关节炎病人的关节滑膜组织商品货号:YS-01X8190种属来源:人产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶包被条件:培养基:原代成纤维细胞培养体系换液频率:每2-3天换液一次生长特性:贴壁培养细胞形态:成纤维样细胞传代特性:细胞特性确定传代传代比例:消化液:0.25%胰蛋白酶培养条件:气相: 空气,95%;CO2 ,5%细胞简介:滑膜是关节囊的内层,淡红色, 平滑闪光,薄而柔润,由疏松结缔组织组成。关 节腔内的所有结构, 除关节软骨、半月软骨板以外,即便是通过关节腔的肌腱、韧 带等均全部为滑膜所包裹。滑膜分泌滑液,在关节活动中起重要作用。正常滑膜 分为两层, 即薄的细胞层(内腔层)和血管层(内膜下层),是血管丰富的关节囊内膜 ,贴附于非关节面部分, 覆盖于关节囊内的骨面上,不在软骨面上,此部分称为 边缘区或“裸区”。滑膜呈粉红色, 光滑发亮、湿而润滑,有时可见绒毛, 内含 胶原性纤维。滑膜细胞有A、 B两型。巨噬细胞样A型细胞,表面有丝状伪足、浆 膜内陷、囊泡、线粒体、溶酶体、胞浆纤维和高尔基体, 具有吞噬功能; B型成纤 维样滑膜细胞(FLS) ,有高浓度的内质网结构, 是介导 RA 关节破坏的主要细胞。原代细胞试用的实验类型:原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:一、细胞增殖检测:常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成二、细胞周期检测常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法三、细胞凋亡检测常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL四、细胞转移能力检测常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验原代细胞培养方法及注意事项:1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。公司正在出售的产品:
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