- ￥2800 - 6200
- 上海研生
- YS-01X8147
- 国产
- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型：
否
- 供应商：
上海研生
- 库存：
49
- 生长状态：
贴壁
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
上皮样，多角形细胞
- 物种来源：
人
- 组织来源：
小肠组织
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 细胞名称 | 人小肠粘膜上皮细胞 | 组织来源 | 小肠组织 |
| 商品货号 | YS-01X8147 | 种属来源 | 人 |
| 包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
| 生长特性 | 贴壁培养 | 细胞形态 | 上皮样，多角形细胞 |
| 传代特性 | 细胞特性确定传代 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 原代上皮细胞培养体系 | 培养条件 | 气相： 空气，95%；CO2 ，5% |
| 细胞简介 |
| 小肠位于腹中， 上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连， 是食物消化吸 收的主要场所。一般根据形态和结构变化将小肠分为三段，分别为十二指肠，空 肠和回肠。 小肠壁结构一般分4层，由外向内依次为：浆膜层， 平滑肌层，粘膜下 层和粘膜层。粘膜层又分为3层： 靠近粘膜下层的是一层平滑肌，称为粘膜肌层。 其次为结缔组织，又称为固有层。后面向肠腔的是一层柱状上皮细胞构成的粘 膜。小肠粘膜有纵行和横行皱襞，并有无数细小的指状突起， 称为绒毛。绒毛的 基底处粘膜内陷成管状， 称为利贝屈恩氏隐窝。隐窝基底部的上皮细胞不断地进 行有丝分裂，产生新细胞。隐窝上皮中还有许多杯状细胞，它分泌粘液，起滑润 食物和保护粘膜的作用。 |
质量检测：实验室分离的人小肠粘膜上皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人小肠粘膜上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，人小肠粘膜上皮细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
人小肠粘膜上皮细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈上皮样，多角形细胞 ，在技术部标准操作流程下，细胞可传2-3代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，
37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验
器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL
（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验柱状上皮主要被覆于鼻腔、鼻咽、支气管树、胃肠、子宫颈管、子宫内膜及输卵管等部位。柱状上皮脱落细胞主要包括涂片纤毛柱状细胞、粘液柱状细胞和储备细胞。 （1）纤毛柱状细胞：细胞呈锥形，顶端宽平，其表面有密集的纤毛，纤毛巴氏染色呈亮红色；胞质泡沫状，巴氏染色染蓝色，HE染淡红色；核圆形位于细胞中部，染色质细颗粒状。在涂片中的常见排列形式： 1）蜂房状排列：细胞成群或呈片医学教育|网搜集整理，排列紧密，不重叠。 2）栅栏状：细胞紧密排列，医学教育|网搜集整理可有重叠
复层鳞状上皮，一般有10多层细胞。被覆于全身皮肤、口腔、喉部、鼻咽的一部分、食道、阴道的全部以及子宫颈。鳞状上皮细胞分为基底层细胞、中层细胞和表层细胞。 （1）基底层细胞 1）内底层细胞：细胞呈圆形或卵圆形，直径12～15μm；胞质巴氏染色呈深蓝、暗绿和灰蓝色，HE染色呈暗红色；胞核圆形或卵圆形，居中，染色质细颗粒状；核与胞质比（即核的直径与细胞质幅缘之比，简称核胞质比）约1:（0.5～1）。 2）外底层细胞：细胞呈圆形或椭圆形，直径15～30μm；胞质较丰富
涂片中脱落的非上皮细胞成分又称背景成分。包括血细胞、粘液、坏死物及异特等。 1.红细胞涂片中可见到多少不等的红细胞。因红细胞大小较恒定，可作为测定其他细胞大小的标尺。红细胞量的多少与病变性质或取材时局部损伤程度有关。 2.中性粒细胞涂片中常可见多量中性粒细胞。中性粒细胞易变性，胞质溶解而成裸核。主要见于组织炎症时。此外见于癌组织坏死后继发感染时。 3.嗜酸性粒细胞其存在与炎症、变态反应或寄生虫感染有关。 4.淋巴细胞见于炎症，特别是慢性炎症时较多
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