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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
110
- 样本:
血清、血浆及相关液体样本
- 标记物:
详见操作说明
- 适应物种:
人、大鼠、小鼠、植物、动物等
- 应用:
仅供科研实验
- 检测方法:
双抗体夹心法
- 检测范围:
详见操作说明
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)酶联免疫分析试剂盒
Human 28S ribosome RNP antibody,28S rRNP ELISA KIT
产品优势
公司销售的所有产品均配有产品说明、技术资料。我们拥有稳定的科研队伍、先进的实验设备。将针对您的应用需求,为您提供专门的服务。高品质的ELISA试剂盒让您的实验结果更具科学性、准确性、专业性。将节省您大量的时间和精力更好地投入到实验工作中。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)表达。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
实验所需自备试验器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒操作步骤
A.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
B.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
C.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
D.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
E.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
F.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
G.温育:操作同3。
H.洗涤:操作同5。
I.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
J.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
K.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)酶联免疫分析试剂盒 仅供科研实验!
实验结果计算
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
实验时出现的问题描述及解决方案
问题描述:变异系数大
可能原因:加液不正确
相应对策:检查加液情况
问题描述:背景值高
可能原因:检测抗体的工作浓度
酶标版洗涤不完全
洗液有污染
相应对策:使用推荐的稀释倍数
重新阅读操作手册,保证清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞
配置新鲜的洗液
试剂盒性能:请向客服人员索要详细电子版说明书!
人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)酶联免疫分析试剂盒
产品保存温度:2-8℃
产品有效期:6个月
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文献和实验的吸管弃去上清液,用75%乙醇清洗沉淀物,小心搅拌,尽量使沉淀物能够漂浮在乙醇上面。10、离心。4度,7 000g,5分钟。11、用1毫升的吸管弃去上清液,在空气中干燥10分钟。12、用甲酰胺(做Northern)或者DPEC水(做RT-PCR)清洗沉淀物,剂量依RNA沉淀物的多少而定(范围为50-500微升),样品在55-60度下加热10分钟。然后保存在-80度冰箱中备用。二、RNA凝胶和浓度检测检测RNA的质量:检测18s和28s核糖体RNA,样品含总的RNA-rRNA、tRNA、mRNA
领域奠基之作:Cell 重磅报道可胞外展示的糖基化修饰 RNA——glycoRNA
glycoRNA 可能是聚腺苷化(poly-A)的大 RNA。然而研究人员始终无法通过 poly-A 富集纯化 glycoRNA。于是研究人员利用长度依赖的 RNA 沉淀和结合硅胶柱,从小到大进行分离。有趣的是,glycoRNA 只与总 RNA 中一部分小 RNA 分离。 研究人员用蔗糖梯度和 SYBR Gold 染色分析标记的 RNA 分布,结果发现分离的是小 RNA/tRNA,18S rRNA 和 28S rRNA。 为了鉴定 glycoRNA 的转录本,研究人员利用蔗糖梯度从标记的 H9 和 HeLa
的顶峰――曾经无限时髦的基因芯片,而原位杂交的放大效应和它的假阳性使它的定量(半定量,应该)根本算不上定量(至于图象分析一般是给自己“找一个理由先”),用它定位和用蛋白定位的意义不可同日而语,又难做,只有新发现的基因可以在没有得到蛋白和抗体的情况下进行组织或者细胞定位。先谈谈RT-PCR吧 (以后再写别的可不是为了骗分,斑竹大可把他们算作一篇),主要时间和打字问题,实际上很多丁香园中已经有了,我就看到的,不过在看之前我很多都是知道的哦(吐),可不是“剪刀浆糊派”的。我先写提纲,以后每天往里加点内容
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