- ￥2800 - 6200
- 上海研生
- YS-01X7866
- 国产
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型：
否
- 供应商：
上海研生
- 库存：
51
- 生长状态：
贴壁
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
铺路石状细胞，不规则细胞
- 物种来源：
兔
- 组织来源：
脑动脉
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 细胞名称 | 兔脑动脉血管内皮细胞 | 组织来源 | 脑动脉 |
| 商品货号 | YS-01X7866 | 种属来源 | 兔 |
| 包被条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 | |
| 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 铺路石状细胞，不规则细胞 |
| 传代特性 | 根据细胞特性 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 原代内皮细胞培养体系 | 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
| 细胞简介 |
| 脑动脉为肌型动脉，管壁薄，血管周围没有支持组织。但脑动脉血管内膜厚，有发达的内弹力膜。 血管新生是从原有血管系统的内皮细胞增殖、游走而形成新的子代血管分支的过程。脑动脉新生可以重建有效血供，从而改善多发性、弥漫性脑动脉粥样硬化所致的脑缺血，终预防痴呆和脑梗死发生。 |
质量检测：实验室分离的兔脑动脉血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
兔脑动脉血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
兔脑动脉血管内皮细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈铺路石状细胞，不规则细胞 ，在技术部标准操作流程下，细胞可传2-3代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，
37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验
器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL
（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验实验材料： 1. 正常兔大脑皮质组织； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. M199培养液（含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES 10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素）；D-Hanks液；0.05%胰蛋白酶溶液；0.05%胶原酶溶液；15%右旋糖苷（用Hanks配制，pH7.4）； 4. 匀浆器、手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科
一、流体剪切力细胞实验背景液体是每个生物物种的重要组成部分。在生理状态下，许多细胞类型被流体环境包围。典型例子包括：血管内皮细胞，形成血管内层，淋巴管内皮细胞，形成淋巴管内层，肾和肺的上皮细胞。这种液体流动引起剪切应力，这是一种机械力，以多种方式影响细胞形态和行为。在许多标准体外实验中，细胞在没有流动的情况下培养。在这些静态条件下，通常没有考虑剪切应力依赖性细胞变化。实际上，在流动下的体外细胞培养并模拟这种机械刺激并诱导更加接近生理状态的体内生物过程行为很有意义。特别对于研究在生物流体中存在
、a-SMA或Desmin抗体，荧光标记二抗，4%多聚甲醛二、实验器械1、培养皿2、培养瓶3、直剪和眼科剪4、眼科镊和止血钳5、玻璃滴管6、烧杯7、15ml离心管三、实验流程成年大鼠，麻醉，无菌获取主动脉血管↓1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤血管，剥去血管外膜外附着的组织↓纵向剪开血管，内膜向上，用钝镊子横向刮动血管内膜，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）反复洗涤。↓用镊子横向刮动血管，刮下来中膜层，收集中膜用PBS洗涤，加入少量培养基（PriCells），将血管剪切为1×1mm
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