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文献和实验诱变,将第1007位核苷酸由G变为A,从而使第336位氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸,将此glgC的突变基因定名为glgC336。经I2-KI染色法鉴定,突变基因的表达可提高细菌中的糖原含量。 关键词: AGPase; E.coli ; PCR;glgC基因;序列分析;定点突变 Cloning And Site-directed Mutagenesis of glgC Gene From E.coli Y1090 Dong Yunzhou Wang Xiaofeng Jia
摘要:通过PCR,从E.coli K12 Y1090株系中扩增获得glgC基因,插入pUC19的PstI和SacI 位点之间,得到重组质粒pAGP。对所克隆的glgC基因进行全序列测定,结果表明,与已发表的序列相比,有7个核苷酸发生了改变,核苷酸顺序的同源性为99.4 %; 推导的氨基酸序列的同源性为99.2 %, 其中,第296位由赖氨酸变为谷氨酸。通过寡核苷酸介导的定点诱变,将第1007位核苷酸由G变为A,从而使第336位氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸,将此glgC的突变基因定
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