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文献和实验, estimated price $600-$900)。 ELISA-BASED ASSAYS(ELISA分析) What they are:基于酶联免疫反应的转录因子结合分析。 What to use them for:定量转录因子的浓度。 Pros(优点):具有快速,定量和高通量的特点。 Cons(缺点):需要目的转录因子的一种抗体才能进行试验。 Things to keep in mind:ELISA-based assays可以比传统的凝胶迁移分析
HDAC(Histone Deacetylase)组蛋白去乙酰化酶活性测定及药物筛选方案
DAC(Histone Deacetylase)组蛋白去乙酰化酶活性测定及药物筛选方组蛋白去乙酰化酶 (histone deacetylase,HDAC )是一类蛋白酶,对染色体的结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用。一般情况下,组蛋白的乙酰化有利于DNA与组蛋白八聚体的解离,核小体结构松弛,从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合,激活基因的转录。在细胞核内,组蛋白乙酰化与组蛋白去乙酰化过程处于动态平衡,并由组蛋白乙酰化转移 酶(histone
ChIP(染色质免疫沉淀)方法是研究活体“蛋白质-DNA”相互反应的一种非常强大的工具。目前,这种方法用于染色质结构的动力学研究、转录因子的调节和辅助调节因子及其他表观遗传变化的研究。 ChIP的使用过程分为三个主要步骤:第一步,在甲醛固定后分离和破碎染色质;第二步,使用感兴趣的蛋白的抗体完成特定染色质片段的免疫沉淀;第三步,分析免疫沉淀片段以确定出靶标DNA是否与感兴趣的蛋白结合。 ChIP方法是一种复杂的、技术上要求高的过程,尤其是当对转录因子的抗体进行分析时:有多个需要优化的步骤
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