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文献和实验诱变,将第1007位核苷酸由G变为A,从而使第336位氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸,将此glgC的突变基因定名为glgC336。经I2-KI染色法鉴定,突变基因的表达可提高细菌中的糖原含量。 关键词: AGPase; E.coli ; PCR;glgC基因;序列分析;定点突变 Cloning And Site-directed Mutagenesis of glgC Gene From E.coli Y1090 Dong Yunzhou Wang Xiaofeng Jia
,都必须用表面去污净化溶液如RNaseZap或RNaseZap Wipes 来处理过。必须保证一直使用无RNase的枪头、试管和溶液,手套也应经常更换。 8. 正确的沉淀 纯化得到的RNA可能需要通过沉淀来浓缩,以满足一些下游应用的需要。醋酸铵(NH4OAc) 沉淀(加0.1体积的5 M 醋酸铵、2~2.5体积的无水乙醇,-20°C放置25分钟以上)可以很好地回收RNA。如果需要定量回收低浓度的RNA(ng/ml),可以采用共沉淀(如糖原glycogen、酵母yeast RNA或linear
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素敏感性,常常与TNF-α 的作用相反。1,4 它作用在肝脏和骨骼肌上,促进葡萄糖吸收,刺激脂肪酸吸收和氧化,并抑制肝糖原异生和脂肪生成。5 通常还认为脂联素通过在一定程度上抑制TNF-α 产生并拮抗TNF-α 对血管内皮细胞的影响而抑制组织炎症。5,6 在成年人中,循环的脂联素水平与脂肪组织量成反比,而血浆中HMW脂联素水平的降低与代谢综合征相关的状态有关,包括上身肥胖、血脂异常和胰岛素抵抗。1,7 R&D Systems 提供了首个ELISA 试剂盒,能够准确定量人类血清和血
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