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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 肿瘤类型:
否
- 供应商:
上海研生
- 库存:
23
- 生长状态:
贴壁
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
内皮细胞样
- 物种来源:
小鼠
- 组织来源:
肠组织
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞名称:小鼠肠微血管内皮细胞
组织来源:肠组织
商品货号:YS-01X7516
种属来源:小鼠
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
传代比例:
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠肠微血管内皮细胞分离自肠道组织;肠道指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中长的一段,也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经肛门排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。微血管是极细微的血管,管径平均为6-9μm,连于动、静脉之间,互相连接成网状。微血管壁薄,管径较小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。其管壁主要由一层内皮细胞构成,在内皮外面有一薄层结缔组织。另外还常可见到一种扁而有突起的细胞贴在微血管的管壁外面,称为周细胞。
原代细胞试用的实验类型:
原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究等。在这些应用中几乎都涉及了几个最常见的且最基础的细胞实验,如下:
一、细胞增殖检测:
常见检测方法:CCK8检测法 ,MTT检测法,Brdu检测法,Edu检测法,平板克隆形成
二、细胞周期检测
常见检测方法:流式检测细胞周期,标记有丝分裂百分率法
三、细胞凋亡检测
常见检测方法:流式检测细胞凋亡,线粒体膜电位,活性氧检测,Hoechst染色,电镜,TUNEL
四、细胞转移能力检测
常见检测方法:细胞划痕实验,Transwell实验,Invasion实验
原代细胞培养方法及注意事项:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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文献和实验脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的重要成分,与外周血管内皮细胞不同,它具有高跨内皮阻抗(transendothelial electrical resistance,TER)、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择性双向跨细胞膜转运系统等独有的特征,从而使血脑屏障形成一个限制大多数极性分子和蛋白质运动的选择性低渗透性的屏障[1]。由于体外培养的脑微血管内皮细胞保持了较多的其体内固有的特点[1],因此目前脑微血管内皮细胞
原代微血管内皮 细 胞( Primary Microvascular Endothelial Cells )的体外分离培养 微血管内皮细胞生长因子的应用和免疫磁珠技术的发展,使微血管内皮细胞的培养和纯化变得相对简化。 1、微血管内皮细胞培养简述人体主要器官和组织的微血管内皮细胞已经培养成功的有:骨骼肌、心、脑、胃、视网膜、肺、皮肤、脉络膜、小肠、脂肪、肝窦、肾、关节滑膜、胎盘、骨髓、胰岛、角膜及食道等器官组织的微血管内皮细胞。 2、微血管内皮细胞的分离目前分离内皮细胞的方法主要有三种
。经孔径为110μm尼龙筛网过滤,将滤液以4000r/min离心10min; 4. 弃离心后的上清液。给沉淀加入15%右旋糖苷溶液,重新悬浮沉淀。然后,再以4000r/min离心20min。收集微血管片段; 5. 用0.05%胶原酶溶液消化2—4h。用Hanks液洗涤并离心,给微血管片段加入M199培养液; 6. 接种到培养瓶中,置37℃、5%CO2 的培养箱中(湿度100%)培养 7. 24h后换液,将未贴壁的微血管段移入其它培养瓶或皿中继续贴壁生长。之后,每3d换液
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