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大鼠视网膜Muller细胞

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  • ¥2800 - 6200
  • 上海研生
  • YS-01X7378
  • 国产
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 肿瘤类型

    • 供应商

      上海研生

    • 生长状态

      贴壁

    • 是否是肿瘤细胞

    • 细胞形态

      梭形、多角形

    • 物种来源

      大鼠

    • 组织来源

      视网膜组织

    • 规格

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    大鼠视网膜Muller细胞
    一、基本信息
           细胞名称        大鼠视网膜Muller细胞          组织来源      视网膜组织
    商品货号 YS-01X7378 种属来源 大鼠
    包被条件       换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁 细胞形态 梭形、多角形
    传代特性 可传2-3代 消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
     
    细胞简介
    大鼠视网膜Muller细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力强。视网膜Muller细胞作为视网膜中的主要胶质细胞,大约占视网膜胶质细胞的90%,因而在视网膜疾病中起着何种作用也受到越来越多的关注。在超微结构水平上,Muller细胞的胞质似乎比临近的其他细胞更高的电子密度,更发达的内质网,细胞核是典型的卵圆形或多角形。但在不同物种中或同一物种中的不同部位,Muller细胞形态也会有所差异的。视网膜Muller细胞是一种特化的神经胶质细胞,不仅具有维持视网膜的正常结构和功能的作用,并调制视网膜神经元活动,还能参与多种病理过程,尤其是眼底增殖性病变,如增生性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变等,体外培养Muller细胞是研究这些增殖性病变途径之一。
    方法简介:实验室分离的大鼠视网膜Muller细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
    质量检测:实验室分离的大鼠视网膜Muller细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    大鼠视网膜Muller细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法
    大鼠视网膜Muller细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈梭形、多角形 ,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,
    37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度
    的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内
    加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验
    器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL
    (0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。产品细节图片1


    原代细胞培养方法及注意事项:
    1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
    2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
    3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的
    混合液中30~60分钟。
    4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒
    入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
    5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化
    时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
    6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即
    终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,
    加入适量含有血清的培养液。
    7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在
    7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
    8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。产品细节图片2
    产品细节图片3
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