- ￥2800 - 6200
- 上海研生
- YS-01X7139
- 国产
- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 技术资料
- 肿瘤类型：
否
- 供应商：
上海研生
- 库存：
49
- 生长状态：
贴壁
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 细胞形态：
内皮细胞样
- 物种来源：
大鼠
- 组织来源：
肝动脉组织
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
一、基本信息
方法简介：实验室分离的大鼠肝动脉内皮细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：实验室分离的大鼠肝动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠肝动脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，大鼠肝动脉内皮细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠肝动脉内皮细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈内皮细胞样 ，在技术部标准操作流程下，细胞可传2-3代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，
37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验
器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL
（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的
混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒
入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化
时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即
终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，
加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在
7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品：
| 细胞名称 | 大鼠肝动脉内皮细胞 | 组织来源 | 肝动脉组织 |
| 商品货号 | YS-01X7139 | 种属来源 | 大鼠 |
| 包被条件 | PLL(0.1mg/ml)，明胶(0.1%) | 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
| 传代特性 | 贴壁 | 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 | 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
| 细胞简介 |
| 大鼠肝动脉内皮细胞分离自肝动脉组织；在胚胎期，肝脏有3条动脉供血，分别来源于胃左动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉，这3条动脉分别供应肝脏的不同部位。出生后，一般保留一条动脉，大部分为起源于腹腔动脉的动脉，由其分出左、右肝动脉供应左、右半肝。偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的情况，如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉(25%)，起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动脉(10%)，而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。此外，还有5%像胚胎期一样，3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为迷走肝动脉，如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时，此种异位起源的肝动脉称替代动脉，如果在常见肝动脉类型外，还有一支这种异位起始的动脉供应肝脏的一部分血流，这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉内皮细胞是衬于肝动脉内表面的单层扁平上皮，在炎症时高表达黏附分子，与血流中白细胞表面黏附分子相互作用，从而介导白细胞穿越血管壁，亦属一类非专职抗原提呈细胞。它们吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织，还参与集体免疫活动，包括：①血管收缩及血管舒张，从而控制血压；②凝血(血栓形成及纤维蛋白溶解)；③动脉硬化；④血管生成；⑤炎症及肿胀(浮肿)；⑥内皮细胞亦控制一些物质，如白血球进出血管。 |
质量检测：实验室分离的大鼠肝动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠肝动脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，大鼠肝动脉内皮细胞以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠肝动脉内皮细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈内皮细胞样 ，在技术部标准操作流程下，细胞可传2-3代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，
37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度
的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内
加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验
器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL
（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
原代细胞培养方法及注意事项：
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。
3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的
混合液中30~60分钟。
4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒
入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化
时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即
终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，
加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在
7.2~7.4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHCO3调整。
8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶盖需拧松半圈。
公司正在出售的产品：
| 恒河猴肾细胞MA-104（种属鉴定） | 乙酰化组蛋白H3封闭多肽 |
| 人恶性多发性畸胎瘤细胞NTERA-2(STR鉴定正确) | 蛋白质磷酸酶2调节亚基5C/PP2A-B56-γ封闭多肽 |
| 人甲状腺癌细胞TT (STR鉴定正确) | 磷酸化原癌基因c-Raf封闭多肽 |
| 人乳腺癌细胞MDA-MB-361(STR鉴定正确) | 胞浆-5´-核苷酸酶-Ⅱ封闭多肽 |
| 猴肾细胞Marc145（种属鉴定） | 凋亡加强结构域蛋白11封闭多肽 |
| 人骨髓横纹肌肉癌细胞SJCRH30(STR鉴定正确) | 肿瘤坏死因子诱导蛋白2封闭多肽 |
| 人前列腺癌细胞22Rv1(STR鉴定正确) | 艾滋病病毒p55/p17封闭多肽 |
| 人肺癌细胞CAL-12T(STR鉴定正确) | B和T淋巴细胞衰减蛋白封闭多肽 |
| 人卵巢癌细胞株COC1(STR鉴定正确) | 磷酸化原癌基因蛋白18封闭多肽 |
| 人结肠癌细胞HCT-116(STR鉴定正确) | 细胞表面趋化因子受体7封闭多肽 |
| 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化)PC-12（种属鉴定） | 异质核核糖核蛋白L样蛋白封闭多肽 |
| 人急性淋巴细胞白血病细胞CEM/C1(STR鉴定正确) | 膜二肽酶3封闭多肽 |
| 人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat(STR鉴定正确) | 大鼠肝动脉内皮细胞半胱氨酸蛋白酶8封闭多肽 |
| 人胚肺细胞 MRC-5(STR鉴定正确) | CENTA2蛋白封闭多肽 |
| 正常大鼠肾细胞（EGF受体阳性）NRK-49F（种属鉴定） | 锌指蛋白169封闭多肽 |
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大鼠肝动脉内皮细胞
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