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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
人细胞系
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
28
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 物种来源:
人
- 规格:
1×10^6cells
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| P3X63Ag8U1[P3U1]细胞 | 1×10^6cells | BJ-X6496 |
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
选择培养基没有一定的标准:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
下列是公司正在出售的产品:
CD40LG Others Cynomolgus 食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA 试剂盒 IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgM 0.1ml
FSH receptor: 促卵泡刺激素受体抗体 人肝细胞RNAHH miRNA5 μg
Caki-1细胞,人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 绿猴猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞,RF/6A细胞 CL-0414PC-3M-IE8(人前列腺癌高转移细胞株)5×106cells/瓶×2 兔肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗马IgM 0.1ml
FGF12: 成纤维细胞生长因子12抗体 EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人细胞裂解液 (阳性对照)
GC-1, 鼠精原细胞 兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA 试剂盒 IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗马IgM 0.1ml
IL36A Protein Mouse 重组小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 大鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA试剂盒 MT(Mouse Melatonin) 小鼠褪黑素 96T
Mst2: 蛋白激酶MST2抗体 GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基 100mL 大鼠硒蛋白P(SEPP1)ELISA试剂盒 IL-18(Human Interleukin 18) 人白介素18 96T
MSY2: DNA结合蛋白C抗体 TE-11细胞,食管癌细胞 人食管癌细胞,CaEs-17细胞 大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J
SPINK4 Others Mouse 小鼠 SPINK4 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠戊糖素(PTD)ELISA试剂盒 CD44 大鼠CD44分子 96T
P3X63Ag8U1[P3U1]细胞人正常肺上皮细胞;BEAS-2B 人淋巴内皮细胞完全培养基 100mL 大鼠蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA试剂盒 ET-1(Human Endothelin 1) 人内皮素1 96T
CAF1p55: 染色质组装因子1P55抗体 肾癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml
人骨髓间充质干细胞(hMSCs) 大鼠蛋白激酶Cα(PKCα)ELISA试剂盒 FSH(Human follicle-stimulating hormone) 人促卵泡素 96T
PTRF: RNA聚合酶1和转录释放因子抗体 CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照)
NCI-H524 人小细胞肺癌 大鼠蛋白激酶C(PKC)ELISA试剂盒 f- BetahCG(Human free chorionic gonadotropin) 人游离β绒毛膜促性腺激素
HCMV UL49: 人巨细胞病毒UL49蛋白抗体 CD36 Others Mouse 小鼠 CD36 / GP3B / SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA 试剂盒 IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原 0.5mg
HNF1 beta: 肝细胞核因子1β/HNF-1β抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0919
NCI-H292(人肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 人促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒 IL-12(Interleukin-12) 白介素12抗原(白细胞介素-12) 0.5mg
HHLA3: HHLA3蛋白抗体 猪角膜上皮细胞PCEpiC
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文献和实验率及所产生的杂交瘤细胞系的稳定性等方面均可与PS-X63-Ag8或P3-NS1/1-Ag4-1相比拟。 4.小鼠P3-X63-Ag8-U1(1980年Sharon)。是P3-X63-Ag8骨髓瘤细胞系的变系。P3-X63-Ag8分泌重链(rl)和轻链(K),P3-NS1/1-Ag4-1则只合成而不分泌轻链(K)。 5.小鼠SP2/O-Ag14(1978年Shulman)。Kohler等将PS-X63-Ag8骨髓瘤细胞系与具有抗绵羊红细胞活性、产生r2b重链和K轻链的BALB/c小鼠脾细胞
与小鼠骨髓瘤细胞(P3-X63/Ag8)融合,融合的细胞既获得了亲代脾细胞分泌特异性抗体的特性,又具有骨髓瘤细胞大量繁殖的能力,成为一种既能分泌特异性抗体又能长命的杂交瘤细胞。该技术为抗体的分子生物学研究提供了全新的手段。极大地促进了免疫学,遗传学,分子生物学的快速发展。 但传统抗体目前也面临诸多问题,如: 每使用一管新抗体都需要进行滴定测试; 多种同型对照,实验设计繁琐; 需要添加Fc阻断试剂; 抗体不佳,阳性细胞群不明显; 抗体作为细胞生物学和生物化学中最重要的试剂之一,科学界每年在这类
鸟嘌呤 - K (不分泌型) P3/X63-Ag8.Ul(P3Ul) ( X63 × BALB/C 脾细胞)杂交瘤 8- 氮
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