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- 中国
- 353803
- 2025年07月13日
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文献和实验人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南
为成熟的肺类器官。多余的 AFE 细胞可以使用 3dGRO™ 类器官冷冻培养基 (SCM301) 以每管3-6 x 106 个细胞进行冷冻保存。 图 2. 前肠内胚层 (AFE) 标记表达。 大约 95-100% 的 AFE 细胞对 Sox2（A、C、AB5603A4）和 Pax9（B、C）呈双阳性。 大约 20-30% 的 AFE 细胞对 EpCAM（D、F、MAB4444）和 Pax9（E、F）呈双阳性。 第 3 步：将 AFE 细胞分化为肺芽类器官（第 8-25 天） 1. 将 1 mL
2．mESC株 RB1 12保持于ES细胞培养基包括Knock-out™培养液(10829-018；Gibco，UK)，辅以15％ES标准的FCS(10439-024；Gibco)，2mM L-谷氨酰胺(15039-027；Gibco)，0.1 mM 2 -巯基乙醇(M7522；Sigma)，1％氨基酸液(11140-035；Gibco)，100 U / mL青霉素和100μg/ mL链霉素(15070-063；Gibco)。 提示： 小鼠胚胎成纤维细胞(mEF
菌液各10 90mm);37℃倒置培养过夜或30℃培养24-36hr，计数平板上单克隆菌落数。fLB培养液在1.5ml离心管中振荡混匀，涂布LB/Amp平板 4. 确定待扩增的cDNA文库滴度(cfu/ml)=克隆数×108(1:106稀释)或克隆数×1010(1:108稀释)。 5. 按照>150mm)，共100块;37℃倒置培养过夜。f2-4×104cfu/平板的浓度，涂布LB/Amp平板( 6. 在超净工作台上，在所有生长菌落的平板上加适量LB培养
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