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- MedChemExpress(MCE)
- 美国
- HY-W768291
- 2025年12月05日
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[1-13Cgal]Lactose monohydrate
MCE 国际站：[1-13Cgal]Lactose monohydrate
产品活性：[1-13Cgal]Lactose (monohydrate) 是一种被标记的乳糖一水合物。
研究领域：Others
作用靶点：Others
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文献和实验分析： 为什么阴性对照会有带？我想起表达毒性蛋白的protocol. 表达毒性蛋白的时候，由于DE3可能根本就不长，或者长得很慢，这时候我们会在培养基中加glucose。当培养基中有其他首选碳源，如glucose时，细菌会优先选择glucose，而glucose会抑制cAMP的活性从而关闭乳糖操纵子。 为什么要加入glucose呢？我们用的DYT或者LB培养基中含有丰富的tryptone。后者可能含有微量的乳糖。 所以虽然没有加IPTG，其中的lactose同样可能诱导蛋白的表达。这样毒性
是positive expression control。是pET15b携带b-galactosidase的一个构建。泳道1－8是全细胞蛋白电泳；泳道9－12是取沉淀电泳；13－16是上清电泳。结果：a. 有glucose的阴性对照无带（或非常浅）。b. 无glucose的阴性对照有带，但整体来说比诱导的弱。c. 诱导的有带。d. 蛋白大小还是不对（其实是对的，我冤枉它了，请看后面的帖子）。结论：培养基中确实很可能存在lactose。而且应该是造成阴性对照有表达的原因。 现在头疼的就是分子量的问题
for 30-60 minutes. 3. Heat the reaction at 65degC for 10 minutes to inactivate the kinase. G. Bacterial cell maintenance Four strains of E. coli are used in these studies: JM101 for M13 infection and isolation (4), XL1BMRF
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