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146478-72-0
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FR901464
CAS No. : 146478-72-0
MCE 国际站:FR901464
产品活性:FR901464 是一种有效的剪切体 (spliceosome) 抑制剂,具有显著的抗肿瘤和抗癌作用。
研究领域:Others
作用靶点:Others
In Vitro: FR901464 (10-20 ng/ml; 6-24 hours) inhibits the growth of murine solid tumors, Colon 38 carcinoma and Meth A fibrosarcoma. FR901464 induces characteristic G1 and G2/M phase arrest in the cell cycle and internucleosomal degradation of genomic DNA with the same kinetics as activation of SV40 promoter-dependent cellular transcription in M-8 tumor cells.
FR901464 (1-10 ng/ml; 16 hours) suppresses the transcription of some inducible endogenous genes but not house keeping genes in M-8 cells.
FR901464 exhibits potent anticancer activity.
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热门产品线:重组蛋白 | 化合物库 | 天然产物 | 荧光染料 | PROTAC | 同位素标记物
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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文献和实验PCR剪接VHCDR3基因文库和VL基因构建scFv基因文库
酶(2单位),1.0ul在有加热盖PCR仪中以94℃1.5分钟、65℃1.5分针、72℃1,5分钟无扩增循环7次,连接片段。2. 7次循环后,保持在94℃,添加含有旁侧引物的25ul混合液:去离子水,15.2ul10×Vent缓冲液,2.5ul20×dNTP(每种5mmol/L), 1.3ulFdSEQ引物 (10pmol/u1), 2.5ulLMB3引物(10pmmol/ul),2.5ulVentDNA聚合酶(2单位),1.0ul3. 以94℃1分钟、42℃1分钟、72℃2分钟的条件共循环30次
-PCR技术扩增出小鼠抗体重链、轻链可变区基因(VH,VL),PCR扩增条件为:94℃ 1?min,55℃ 2?min,72℃ 2?min。循环30次。用Linker将等摩尔量的VH,VL交联形成单链抗体可变区片段(ScFv)。经NotⅠ、SfiⅠ双酶切后,在T4连接酶的作用下与经同样双酶切的pCANTAB5E载体相连,转化入大肠杆菌TG1以构建鼠抗内毒素单链噬菌体抗体库。在援救噬菌体抗体库后,用内毒素淘筛特异性的ScFv,富集的噬菌体阳性克隆 重新感染TG1。然后在96孔板分别援救单个含特异性ScFv
的设计和合成 根据Ig可变区基因的序列特点,以及已发表的小鼠VH和VL基因序列,设计若干套分别对应于不同亚类Ig骨架区序列FR1和FR4的通用引物。为了便于克隆和表达,在引物两端引进合适的酶切位点。其中VH5’端引物为XhoI识别序列,VH3’端引物为SpeⅠ识别序列;VL 5’端引物为XbaⅠ,3’端引物为EcoRⅠ。利用不同的5’端和3’端引物组合进行相同的PCR扩增抗小细胞肺癌单抗的VH和VL基因,发现如下一套引物扩增效果最好;扩增产物琼脂糖凝胶电泳带均一,且无杂带。其序列如下:
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