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文献和实验%胰蛋白酶传代分瓶。 鸭胚成纤维细胞原代培养 1.材料 1.1 10-12日龄非免疫受精鸭胚 购于雅安偏远山区 1.2标准胎牛血清(FBS) Tianjin.h&y bio.co;ltd 1.3MEM营养液(细胞增殖液;细胞维持液;洗液) GIBCO Invitrogen Corporation 1.410倍胰酶 (自配) 1.5抗生素 医用80万单位青霉素和医用100万单位链霉素 1.6灭菌的无钙、镁平衡盐溶液(自配) 2.实验器材与仪器 2.1实验器材 国产玻璃螺旋口细胞培养瓶
,比如Millicell® EZ SLIDE 8孔无菌腔室载玻片(货号PEZGS0816) 4.混合液37 0C孵育20分钟。也可以室温孵育,但凝固所需时间更久。 5.吸头轻触凝胶,检查凝胶是否形成。收回吸头后,吸头表面没有凝胶线代表成胶。 6.加入充足的培养基覆盖凝胶。 7.培养皿或培养瓶盖上盖子,在组织培养箱中培养。 8.培养1小时后,更换培养基(换液)。 9.细胞培养期间按照要求换液。 采用TrueGel3D™酶促细胞回收液溶解TrueGel3D™水凝胶细胞 向培养基中添加TrueGel3D™酶促细胞回收液
麻醉或颈椎脱臼处死后. 将小鼠的尾巴提起. 整个身体浸入装有75%酒精的烧杯中3sec左右(默数5下). 取出放置到灭菌的培养皿中. 移入工作台内。用有齿弯镊迅速摘除小鼠眼球. 转移至超净台中的解剖显微镜载物台上的冰盒上. 冰盒上覆盖经过无菌处理(120度烘烤4-6小时)的平展的锡纸。用眼科显微器械(显微镊. 显微剪刀. 显微剔刀等)在显微镜下仔细剥离视网膜(具体步骤可见上面帖子中的《视网膜铺片ADP酶染色》)剥离出视网膜组织后. 迅速用显微剔刀转移至提前准备好堵塞细胞培养瓶或培养皿中
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