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麦格生物
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文献和实验、一套开胸取心,一套剔除心缘纤维组织,一套剪碎心脏) 瓶皿(2套)[两个小圆培养皿,培养皿内加DMEM液,先后装取出的心和剔出纤维组织后的心] [一个小烧杯装碘酒和酒精棉球] 250ml烧杯3个[一个用于水浴,事先加好水,最好是一或二蒸] [一个装0.1%新洁尔灭150ml左右,消毒小鼠] 500ml烧杯1个,用作废液缸。 50ml烧杯3个(剪碎心肌组织,最后配液) 三角烧杯(50ml)+小转子(小转子,酒精擦,双蒸水冲后,再把酒精彻底冲掉后用三角烧杯高压) 离心管及帽(12-14
3离心后. 离心管内分为三层. 上层为血浆和PBS液. 下层主要为红细胞和粒细胞。中层为淋巴细胞分离液. 在上层中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层. 为淋巴细胞和单核细胞和少量血小板的混合物。 4用1 Ml吸管插到云雾层. 吸取单个核细胞。置入另一15 Ml离心管中. 加入5倍以上体积的PBS. 1 500 rp M×10 Min. 洗涤细胞两次。 我的心得: 第2步. 一定要缓慢添加
兔IgG(62197)或Atto 594抗兔IgG(76085)可在非渗透性封闭缓冲液中以1:200稀释度使用。注:Hoechst 3358(94403)复染(PBS中1:500稀释)可与二级抗体一起添加,以复染细胞核(150µl/孔)。 用PBS(D8537)(200 µl/well)清洗三次,每次5-10分钟。 图像:通过配备20-30倍物镜的倒置荧光显微镜或共焦荧光显微镜,可以获得亮场和荧光图像,显示跨越水凝胶整个深度的图像信息。 分化骨髓间充质干细胞Oil-Red-O 和 碱性磷酸酶染色 脂肪
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