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999
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麦格生物
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文献和实验离子水冲洗3遍,双蒸水冲洗3遍,烤干5.超净台中紫外线照射2个小时左右,就可以用了,不可以高压。做法4:1、测完值的96孔板甩掉孔内培养液,放入超声中超10-30分钟,晾干(或烘干)备用。此步骤可最大程度的洗去污垢及细胞。2、每孔加入50-100ul的胰酶(0.05%),我一般加60ul,加完胰酶后水平振荡96孔板以使胰酶均匀覆盖于细胞表面,室温下放置至细胞被消化脱落为止。假如你想消化快一点的话可将96孔板放到37度培养箱内(胰酶在37度时的活力最大)。对于顽固贴附在壁上的细胞,此步骤最为有效。3、甩掉胰酶
用血清去除细胞8小时,再用无血清的DMEM洗三次细胞。在DMEM中培养细胞。6. DMEM中加入EDTA使终浓度为10 mM,用以分离细胞。显微镜下观察细胞确保细胞完全分离,分离过程需要约10分钟。7. 用无EDTA的DMEM清洗细胞两次;用含有0.1%BSA的DMEM重悬细胞,使细胞在DMEM中的浓度为2×105cells/ml。8. 为了进行细胞吸附试验,在用血清覆盖的96孔板的每孔中加入步骤7中的100 μl 细胞悬浮液。将平板置于37°C培养细胞20分 钟,使细胞附着在表面
型板﹐但这种试验也可用U型板替代(加入细胞后﹐低速离心)如果是养细胞的话,通常是选用平底的, 另外要特别注意材质, 标示"Tissue Culture (TC) Treated"就是养细胞用的。 圆底的好像没听说过拿来养细胞。 圆底的通常是拿来做分析, 化学反应, 或是保存样品用的, 因为圆底比较好将液体吸得干净,如果用平底的就不好吸了。 不过, 如果你是要测吸光值的话, 一定要买平底的才行。大部分细胞培养都用平底培养板,便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致
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