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文献和实验IN Cell Analyzer 2000:斑马鱼自动化全孔成像
制备: 斑马鱼 幼虫样品是由Phylonix Inc.馈赠的。受精后5天的野生型斑马鱼先在三卡因中麻痹,再用4%多聚甲醛固定。幼虫放置在#3599 Corning Costar 96孔板的150 μl固定培养基中。 图像获取: 图像是用IN Cell Analyzer 2000获取的。物镜为:2×/0.1 NA、4×/0.1 NA、10×/0.45 NA,利用透射光和荧光模式及适当的滤光片和曝光时间。大CCD照相机((Photometrics CoolSnap K4
反应性聚合物与多肽均匀反应。样品孵育20 min,使RGD肽连接到聚合物的马来酰亚胺基上。 3.将交联剂(PEG细胞不可降解交联剂或CD细胞可降解交联剂)加到无菌培养皿*表面。交联剂不要铺开,要保持单滴的液滴形式。 * 可使用多孔板(6、24或96孔)或适用的无菌培养板或培养瓶。推荐使用未经组织培养处理的聚苯乙烯。如需细胞成像,建议使用带细胞培养腔室的载玻片,比如Millicell® EZ SLIDE 8孔无菌腔室载玻片(货号PEZGS0816) 4.在含有水、缓冲液、FAST巯基反应性聚合
一、MTT是什么 MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。(可参考Sigma,货号 M5655, Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide
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