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麦格生物
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文献和实验water:无Rnase的水。方法是:将DEPC按0.01%(V/V)加在dH2O中500 ml(50 ul),在37 ℃过夜,并高压灭菌即得(150 ℃ 3小时) 5. 一次性塑料手套 6. 注意:DEPC有致癌之嫌 7. 抽提出的细胞总RNA干燥后加水50 ul,取10 ul加无Rnase水990 ul,稀释100倍成1 ml。于0.5 cm厚的石英比色杯中,以无Rnase水为对照,在721型紫外分光光度计下检测,结果应为:A260/280 ratio 8. 分离组织10 mg
。 28181 QIAquick 96 PCR Purification Kit——采用真空抽滤的方法,利用硅胶膜技术25分钟内从PCR反应体系中回收高纯度的DNA,回收率高达90%(100bp~10kb),可除掉 99.5 %的引物,无需另外去除石蜡油,无需乙醇沉淀,无需酚、氯仿等有机试剂。纯化产物可直接用于芯片点样或测序。 Telechem 公司:世界著名的芯片供应商,提供各种芯片方面的耗材和试剂。其PCR产物纯化试剂盒利用高级滤膜技术,具有价格低、通量高、速度快等优点。无需乙醇沉淀,无需酚、氯
化钠 20g 蛋白提取物 10g 酵母提取物 加入蒸馏水至1升,用NaOH调pH值至7.0,高压灭菌。 2 x LB-甘油(12.5%)(200ml) 175ml 2 x LB液体 25ml 甘油(100%) 加入蒸馏水至200ml,压灭菌,置于4℃备用。 二、步骤 1.将cDNA文库转入大肠杆菌,如DH5a(DH10B)后,取少量菌液涂布氨苄平板,以推算克隆总量。 2.取一大小合适的三角瓶,根据克隆总量配制2 x LB液体,每500ml 2 x LB液体可扩增5x
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