- ￥694
- Corning
- 美国
- 3779
- 2025年07月11日
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999
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麦格生物
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现货
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/
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文献和实验Evaluating Modulators of “Regulator of G‐protein Signaling” (RGS) Proteins
7.5), 1 mM EDTA, 10 mM MgCl 2 , 10 µM GTP, 10 µg/ml GDP antibody, and 2 nM fluorescent nucleotide tracer; for the protocol below, this will be prepared as a 1.1× solution (18 µl added to a final 20 µl
。凝血酶在这三种中是特异性活性最高的，能够有效切质量比仅为1:2000的蛋白。Xa因子似乎对于切点周围的序列很敏感，经常会出现特异性位点切割不理想却发生别的位点被切割的情况。肠激酶的专一性是上述三种中最好的，但由于切割效率低（通常要求质量比达到1:10）而显得比较昂贵。另一个需要考虑的问题是：切割完成之后，是否需要去除蛋白酶。在质量比比较高的酶切反应进行完后，通常要通过色谱法处理。比较方便可行的方法是采用生物素化凝血酶(货号69672)结合链亲和素琼脂糖（货号69203）一起使用。尽管没有
性非常强的抗体，可以避免高背景和不理想的蛋白定位结果。在大多数情况下，纯化抗体的效果很好，但是正确的对照可以帮助精准定位抗原。使用只有二抗染色的片子作为阴性对照，有利于减少降低背景干扰。 3. 合适的抗体稀释比例 通过优化抗体稀释比例来优化染色，通常情况下 1ug/ml 的纯化抗体或者 1:100-1:1000 的抗血清足够达到特异性染色的结果。但在能保证低背景染色的前提下，可以通过增加浓度来提高信号强度。如果是第一次使用该抗体或测定某抗原，强烈建议浓度梯度实验。 4. 优化
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