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- 详细信息
- 技术资料
- 细胞类型:
人细胞系
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
28
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 物种来源:
人
- 规格:
1×10^6cells
细胞系具有易培养、品类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
细胞系的实验步骤:
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
选择培养基没有一定的标准:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
下列是公司正在出售的产品:
人无色素睫状上皮细胞裂解物HNPCEpiCL 人叶酸受体(FOLR)ELISA试剂盒 Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗亲和素 0.1ml
GPR1: G蛋白偶联受体1抗体 tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL
PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人细胞裂解液 (阳性对照) 人叶酸(FA)ELISA 试剂盒 PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗亲和素 0.1ml
GPR100: G蛋白偶联受体100抗体 人少突胶质前体细胞裂解物HOPCL
M453细胞,人癌细胞 鼠肉瘤细胞,S-180-S2D9细胞 卵巢癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml 人氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA试剂盒 PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗亲和素 0.1ml
CM-M047小鼠肠微血管细胞完全培养基100mL 大鼠神经营养因子4(4)ELISA试剂盒 TNFsR- I (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor I ) 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ 96T
NPY1R: 神经肽Y1受体抗体 正常大鼠肾细胞;NRK
TE-11(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A-704(人肾癌细胞) 大鼠神经营养因子4(-4)ELISA 试剂盒 Casp-3 大鼠胱天蛋白酶3 96T
NMDAR1: 谷酸受体1抗体 人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1
IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 标签) 大鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒 TNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II ) 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ 96T
CCD-1065Sk细胞ROCK2: Rho相关蛋白激酶2抗体 3T3TK细胞,小鼠成纤维细胞 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg
DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠白介素3(IL3)ELISA试剂盒 Gal-6S(Human galactose-6-sulphate sulphatase) 人半乳糖6酯酶 96T
RRM2: 核糖核苷酸还原酶亚基R2抗体 人结直肠腺癌细胞;COLO 205
CL-0150MDA-MB-231(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒 IDS(Human iduronate sulfatase) 人艾杜糖酯酶 96T
Runx3: Runx3抗体 EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照)
SK-OV-3(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照) 人NK细胞ELISA试剂盒 TEM 1/CDendothelial marker 1 precursor) 内涎蛋白/内皮唾液酸蛋白抗原 0.5mg
IGC: 非洲爪蟾IGC抗体 神经小胶质细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
IL8 Protein Human 重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77) 人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA 试剂盒 TFF3 (trefoil factor3) 三叶肽因子3(多肽) 0.5mg
IFITM1: 干扰素诱导跨膜蛋白1抗体 CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL 人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA 试剂盒 TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor-2) 组织因子途径抑制剂-2抗原 0.5mg
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| CCD-1065Sk细胞 | 1×10^6cells | BJ-X6071 |
一、实验前准备工作
1、提前24h取12mL DMEM(abs9483)和RPMI 1640(abs9484)完全培养基(含10%FBS(abs972),下同)于50mL离心管内,置于4℃冰箱中预冷;
2、将分装好的Matrigel基质胶(abs9490)提前24h从-20℃放入4℃,使其融化成液体状态;
3、将无菌的1mL移液器枪头放入无菌50mL离心管内,置-20℃冰箱预冷。
二、琼脂糖包被96孔板
1、准确量取6mL RPMI 1640培养基(或DMEM培养基)于2个10mL的注射玻璃瓶内,加入90mg琼脂糖(abs44056213),盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30min;
2、加热结束后,将注射瓶放入灭菌锅内,115℃灭菌30min;
3、灭菌完成后,迅速取出注射瓶放入超净台内。将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中,用多通道移液器以每孔60μL的量加入96孔板内。注意:由于琼脂糖溶液在室温时会凝固,因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后
一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。此外,为保证加样时琼脂糖不冷却,需要同时灭菌加样槽和100μL的移液器枪头。
4、加入完成后,96孔板要保持水平约30min使孔内的琼脂糖凝固。
选择培养基没有一定的标准:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
如何正确地使用细胞系?
首先做好细胞系的保存,尽量多的保存早期分裂增殖的细胞系。因为随着传代次数增多,细胞系的稳定性下降,遗传物质,细胞形态,倍增时间等都可能发生改变。其次,熟悉所用细胞系的增殖和生长特点,熟悉它对营养物质的需求。比如,倍增时间,培养液需求特征,血清浓度要求等等。最后,定期做好细胞系鉴定工作,尤其是从外部借来使用的细胞系,要求其遗传谱图与细胞库中的一致。这点关系到你研究研究结果的可靠性和可重复性。
细胞系的用途有哪些?
1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开发
(1)新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2)疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3)基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。
(4)细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究与开发。
(5)单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体。
基础研究
(1)药物作用机理
(2)基因功能
(3)疾病发生机理
2、生物制药
(1)疫苗生产:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(2)基因工程药物生产:如在临床医学中具有治疗价值的一些细胞生长因子如干扰素、粒细胞生长因子、胸腺肽等。
(3)诊断用和药用单克隆抗体生产。
(4)细胞工程药物生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
下列是公司正在出售的产品:
人无色素睫状上皮细胞裂解物HNPCEpiCL 人叶酸受体(FOLR)ELISA试剂盒 Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗亲和素 0.1ml
GPR1: G蛋白偶联受体1抗体 tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL
PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人细胞裂解液 (阳性对照) 人叶酸(FA)ELISA 试剂盒 PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗亲和素 0.1ml
GPR100: G蛋白偶联受体100抗体 人少突胶质前体细胞裂解物HOPCL
M453细胞,人癌细胞 鼠肉瘤细胞,S-180-S2D9细胞 卵巢癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml 人氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA试剂盒 PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗亲和素 0.1ml
CM-M047小鼠肠微血管细胞完全培养基100mL 大鼠神经营养因子4(4)ELISA试剂盒 TNFsR- I (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor I ) 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ 96T
NPY1R: 神经肽Y1受体抗体 正常大鼠肾细胞;NRK
TE-11(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A-704(人肾癌细胞) 大鼠神经营养因子4(-4)ELISA 试剂盒 Casp-3 大鼠胱天蛋白酶3 96T
NMDAR1: 谷酸受体1抗体 人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1
IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 标签) 大鼠神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒 TNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II ) 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ 96T
CCD-1065Sk细胞ROCK2: Rho相关蛋白激酶2抗体 3T3TK细胞,小鼠成纤维细胞 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg
DLL1 Others Rat 大鼠 DLL1 / Delta-like 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠白介素3(IL3)ELISA试剂盒 Gal-6S(Human galactose-6-sulphate sulphatase) 人半乳糖6酯酶 96T
RRM2: 核糖核苷酸还原酶亚基R2抗体 人结直肠腺癌细胞;COLO 205
CL-0150MDA-MB-231(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠白介素3(IL-3)ELISA 试剂盒 IDS(Human iduronate sulfatase) 人艾杜糖酯酶 96T
Runx3: Runx3抗体 EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照)
SK-OV-3(人卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照) 人NK细胞ELISA试剂盒 TEM 1/CDendothelial marker 1 precursor) 内涎蛋白/内皮唾液酸蛋白抗原 0.5mg
IGC: 非洲爪蟾IGC抗体 神经小胶质细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
IL8 Protein Human 重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77) 人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA 试剂盒 TFF3 (trefoil factor3) 三叶肽因子3(多肽) 0.5mg
IFITM1: 干扰素诱导跨膜蛋白1抗体 CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL 人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA 试剂盒 TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor-2) 组织因子途径抑制剂-2抗原 0.5mg
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