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100
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信帆生物
产品简介:
植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧(ROS),ROS 活性非常大且极其不
稳定,因此 ROS 的检测通常因其最终产物而定。超氧阴离子是活性氧的一种,属于一种含
氧自由基,能将 NBT(氮蓝四唑)还原成不溶于水的蓝色甲瓒化合物,从而定位组织中的
超氧阴离子。
植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.4)根据上述基本原理也称为 NBT 染色法,
用于植物活组织中的超氧阴离子染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色,染色后
有超氧阴离子聚集的部位呈蓝色至深蓝色。该产品仅用于科研领域,不用于临床诊断或其他
用途。
自备材料:
1、新鲜的植物叶片或根、自来水、蒸馏水、95%乙醇
2、超声波、磁力搅拌器、电子天平、滤纸、照相机
操作步骤(仅供参考):
1、试剂准备:将 50 mg NBT 加入到 100mL 磷酸缓冲液(pH 7.4) 中充分溶解,即得 NBT
染色工作液,4℃避光保存,一月内有效。注:如果较难溶解,可通过超声、磁力搅拌等
方法促溶。
2、样本准备:采集经胁迫(例如重金属)的采集植物幼苗或根尖,自来水稍洗净,置于滤
纸上吸干多余水分。
3、染色:将植物幼苗或根尖浸入 NBT 染色工作液中,常温避光浸染 2~6 h,至阳性部位
出现深蓝色,其余部位为淡蓝色或近无色或呈植物本身的颜色即可。(根据植物幼嫩程度。
显色程度调整染色时间)
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文献和实验一、原理 超氧物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)普遍存在于动、植物体内,是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2,可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除O2,从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明酶活性愈低,反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。二、材料
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植物 超氧化物歧化酶(SOD ) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞及相关液体样本中 超氧化物歧化酶(SOD ) 的 活性。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 植物 超氧化物歧化酶(SOD ) 水平。用纯化的 SOD 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 超氧化物歧化酶(SOD ) ,再与HRP 标记
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